| 副猪嗜血杆菌及巴氏杆菌双重荧光定量PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 姜睿姣,周丽军,邬旭龙,张鹏飞,罗梓丹,肖璐,王印,姚学萍,杨泽晓,罗燕.副猪嗜血杆菌及巴氏杆菌双重荧光定量PCR检测方法的建立[J].中国预防兽医学报,2019(5):489-494. |
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| 作者姓名： | 姜睿姣 周丽军 邬旭龙 张鹏飞 罗梓丹 肖璐 王印 姚学萍 杨泽晓 罗燕 |
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| 作者单位： | 四川农业大学动物医学院;动物疫病与人类健康四川省重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家农业产业技术体系四川兽药创新团队专项(CARS-SVDIP) |
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| 摘 要： | 为建立副猪嗜血杆菌(Hps)、多杀性巴氏杆菌(Pm)的双重荧光定量PCR检测方法,本研究基于Hps的Omp P2基因,Pm的PlpE基因设计两对特异性引物及探针,通过对反应条件优化,建立了一种同时检测Hps及Pm的双重荧光定量PCR方法。该方法能够特异性地检测Hps和Pm,其对重组质粒标准品的最低检测浓度分别为5.60×10^2拷贝/μL、7.58×10^2拷贝/μL。双重与单一荧光定量PCR最低检测限相同,且均是常规PCR的100倍。重复性试验结果显示,该方法的组内和组间变异系数均小于2.5%。临床应用结果显示:该方法对阳性样品的检出率为53.57%,明显优于常规PCR和细菌分离鉴定。该方法能够用于两种疾病的同时检测和快速排查疾病。为两种疾病的防治提供有效检测工具。
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| 关 键 词： | 副猪嗜血杆菌 巴氏杆菌 双重荧光定量PCR |
Establishment of duplex fluorescent quantitative PCR for Haemophilus parasuis and Pasteurella multocida |
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| JIANG Rui-jiao,ZHOU Li-jun,WU Xu-long,ZHANG Peng-fei,LUO Zi-dan,XIAO Lu,WANG Yin,YAO Xue-ping,YANG Ze-xiao,LUO Yan.Establishment of duplex fluorescent quantitative PCR for Haemophilus parasuis and Pasteurella multocida[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2019(5):489-494. |
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| Authors: | JIANG Rui-jiao ZHOU Li-jun WU Xu-long ZHANG Peng-fei LUO Zi-dan XIAO Lu WANG Yin YAO Xue-ping YANG Ze-xiao LUO Yan |
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| Institution: | (College of Veterinary Medicine,Sichuan Agricultural University,Chengdu 611130,China;Key Laboratory of Animal Disease and Human Health of Sichuan Province,Chengdu 611130,China) |
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| Abstract: | JIANG Rui-jiao;ZHOU Li-jun;WU Xu-long;ZHANG Peng-fei;LUO Zi-dan;XIAO Lu;WANG Yin;YAO Xue-ping;YANG Ze-xiao;LUO Yan(College of Veterinary Medicine,Sichuan Agricultural University,Chengdu 611130,China;Key Laboratory of Animal Disease and Human Health of Sichuan Province,Chengdu 611130,China) |
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| Keywords: | Haemophilus parasuis Pasteurella duplex fluorescent quantitative PCR |
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