| H9N2亚型禽流感病毒冷适应株的培育及SPF鸡胚感染后的免疫应答分析 |
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| 引用本文： | 马鑫鑫,崔宁,历成海,黄庆华,梁立生,杨少华,赵孝民,许传田.H9N2亚型禽流感病毒冷适应株的培育及SPF鸡胚感染后的免疫应答分析[J].中国预防兽医学报,2019(7):726-733. |
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| 作者姓名： | 马鑫鑫 崔宁 历成海 黄庆华 梁立生 杨少华 赵孝民 许传田 |
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| 作者单位： | 山东农业大学动物科技学院;山东省农业科学院畜牧兽医研究所/山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室;山东日照东港区南湖镇畜牧兽医站 |
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| 基金项目： | 十三五国家重点研发计划(2016YFD0500201);山东省博士基金(ZR2017BC094);现代农业产业技术体系(CARS-41-Z10);山东省农业科学院农业科技创新工程(CXGC2016A10) |
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| 摘 要： | H9N2亚型禽流感病毒(H9N2AIV)冷适应疫苗可以弥补灭活疫苗临床保护效果的不足。为明确宿主对冷适应疫苗的免疫应答效应,本研究将H9N2AIV(A/chicken/Shandong/903/2013,CK/903/2013)接种10日龄SPF鸡胚连续降温传代,获得在25℃能够稳定复制的冷适应株Ca30。实验结果显示:Ca30株具备冷适应性和温度敏感性,在传代过程中病毒HA蛋白出现多个位点的氨基酸突变,在25℃传代20次后已经获得稳定的氨基酸突变。动物感染试验结果显示,以106.0EID50的剂量鼻腔感染1周龄SPF鸡,Ca30株仅在喉气管中低水平复制,病毒接种后第3周SPF鸡血清针对Ca30株、异源病毒株1167的血凝抑制效价均达到最高,分别为8.2log2和5.8log2,接种后第4周针对母本病毒CK/903/2013的血凝抑制效价达到最高值7.6log2。qPCR检测结果显示,Ca30在25℃时能够在鸡胚肺脏、肝脏和心脏中复制,对肺脏的亲和力最强。利用qPCR检测冷适应株Ca30接种鸡胚后各脏器细胞因子的转录水平,结果显示,Ca30株感染鸡胚后,引起鸡胚肺脏中IL-1β、IL-6、IL-12、IL-8、OAS和MDA5转录水平上调,上调4.18~16.47倍;感染后8h引起鸡胚心脏中IL-1β、IL-6、IL-12、IL-8、OAS和MDA5的转录水平上调,之后降低甚至下调;72h时引起鸡胚肝脏中IL-1β、IL-6、IL-8和OAS转录水平上调,上调4.28~6.53倍;在鸡胚脑组织中,各类细胞因子的转录水平变化无明显的规律。本研究培育了一株H9N2AIV冷适应毒株Ca30,为深入研究冷适应弱毒疫苗的免疫保护机制提供了素材。
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| 关 键 词： | H9N2亚型禽流感病毒 冷适应疫苗 细胞因子 荧光定量RT-PCR |
Development of cold-adapted vaccine of H9N2 subtype avian influenza virus and immune response in infected SPF chicken embryo |
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| MA Xin-xin,CUI Ning,LI Cheng-hai,HUANG Qing-hua,LIANG Li-sheng,YANG Shao-hua,ZHAO Xiao-min,XU Chuan-tian.Development of cold-adapted vaccine of H9N2 subtype avian influenza virus and immune response in infected SPF chicken embryo[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2019(7):726-733. |
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| Authors: | MA Xin-xin CUI Ning LI Cheng-hai HUANG Qing-hua LIANG Li-sheng YANG Shao-hua ZHAO Xiao-min XU Chuan-tian |
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| Institution: | (College of Animal Science,Shandong Agricultural University,Taian 271018,China;Institute of Animal Science and Veterinary Medicine Shandong Academy of Agricultural Sciences,Shandong Key Lab of Animal Disease Control and Breeding,Jinan 250100,China;Shandong Rizhao Donggang District South Lake Town,Animal Husbandry and Veterinary Station,Rizhao 276817,China) |
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| Abstract: | MA Xin-xin;CUI Ning;LI Cheng-hai;HUANG Qing-hua;LIANG Li-sheng;YANG Shao-hua;ZHAO Xiao-min;XU Chuan-tian(College of Animal Science,Shandong Agricultural University,Taian 271018,China;Institute of Animal Science and Veterinary Medicine Shandong Academy of Agricultural Sciences,Shandong Key Lab of Animal Disease Control and Breeding,Jinan 250100,China;Shandong Rizhao Donggang District South Lake Town,Animal Husbandry and Veterinary Station,Rizhao 276817,China) |
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| Keywords: | H9N2 subtype avian influenza virus cold-adapted vaccine cytokine RT-qPCR |
| 本文献已被 CNKI 维普 等数据库收录！ |
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