| 电穿孔法转染猪胎儿成纤维细胞条件优化 |
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| 引用本文： | 张庆晓,王慧利,孟春花,王锋,曹少先.电穿孔法转染猪胎儿成纤维细胞条件优化[J].江苏农业科学,2012,40(12). |
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| 作者姓名： | 张庆晓 王慧利 孟春花 王锋 曹少先 |
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| 作者单位： | 1. 江苏省农业科学院畜牧研究所/江苏省农业科学院动物品种改良和繁育重点实验室,江苏南京210014;南京农业大学动物科技学院,江苏南京210095
2. 江苏省农业科学院畜牧研究所/江苏省农业科学院动物品种改良和繁育重点实验室,江苏南京,210014
3. 南京农业大学动物科技学院,江苏南京,210095 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，国家转基因生物新品种培育科技重大专项 |
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| 摘 要： | 以增强型绿色荧光蛋白为报告基因,采用L9(33)正交试验设计,对质粒浓度、电压、脉冲时间等3个因素进行优化,并比较了不同温度处理对转染效率的影响,以及电压对细胞存活率的影响.结果表明,3个因素中质粒浓度对转染效率的影响最大,质粒浓度和电压对转染效率均有显著影响,脉冲时间对转染效率的影响不显著.不同温度处理下的转染效率无显著差异,电压显著影响细胞存活率.质粒浓度40 g/mL、电压280 V、脉冲时间800 s条件下,转染效率最高,为89.8％.
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| 关 键 词： | 猪 胎儿成纤维细胞 电穿孔 转染 效率 增强型绿色荧光蛋白 |
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