转导芦苇总DNA耐盐变异水稻SSH文库的构建及部分基因特异表达 |
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引用本文: | 肇莹,肖军,杨镇,杨涛.转导芦苇总DNA耐盐变异水稻SSH文库的构建及部分基因特异表达[J].江苏农业科学,2015(3):13-16. |
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作者姓名: | 肇莹 肖军 杨镇 杨涛 |
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作者单位: | 辽宁省农业科学院微生物工程中心 |
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基金项目: | 辽宁省农业攻关计划(编号:2009208001) |
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摘 要: | 通过花粉管通道转导芦苇总DNA到水稻辽星1号中,以获得的2个耐盐变异水稻品系H1、H2为材料,对6张叶的水稻幼苗进行0.3%浓度的Na Cl溶液诱导处理24 h。提取经Na Cl溶液诱导后的叶片mRNA,经反转录成cDNA,经过酶解后加接头和2次杂交,构建差异表达的抑制消减(SSH)cDNA文库。以Na Cl溶液诱导后的耐盐变异水稻H1、H2的cDNA为检测子(tester),以水稻辽星1号cDNA为驱动子(driver)。所构建的文库容量分别达到了240、281个,表明所构建的文库质量良好。对文库中克隆进行测序分析,在NCBI水稻数据库中进行BLAST比对,获得了15个没有同源性的EST序列,其中9个EST序列功能与植物的抗盐性有关,通过RT-PCR技术进一步验证了芦苇总DNA转导到水稻中,使水稻获得了抗盐性。
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关 键 词: | 水稻 芦苇 抑制消减杂交 cDNA文库 基因表达 |
本文献已被 CNKI 等数据库收录! |
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