兔NF-κB p50蛋白质的原核表达及鉴定 |
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引用本文: | 胡波,魏后军,范志宇,仇汝龙,宋艳华,陈萌萌,朱伟峰,徐为中,王芳.兔NF-κB p50蛋白质的原核表达及鉴定[J].江苏农业科学,2019,47(22). |
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作者姓名: | 胡波 魏后军 范志宇 仇汝龙 宋艳华 陈萌萌 朱伟峰 徐为中 王芳 |
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作者单位: | 江苏省农业科学院兽医研究所/农业农村部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏南京210014;江苏省农业科学院兽医研究所/农业农村部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏南京210014;江苏省农业科学院兽医研究所/农业农村部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏南京210014;江苏省农业科学院兽医研究所/农业农村部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏南京210014;江苏省农业科学院兽医研究所/农业农村部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏南京210014;江苏省农业科学院兽医研究所/农业农村部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏南京210014;江苏省农业科学院兽医研究所/农业农村部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏南京210014;江苏省农业科学院兽医研究所/农业农村部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏南京210014;江苏省农业科学院兽医研究所/农业农村部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏南京210014 |
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基金项目: | 国家自然科学基金;现代农业产业技术体系建设专项 |
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摘 要: | 为获得可溶性表达的兔NF-κB p50蛋白,本研究对兔p50基因进行大肠杆菌密码子优化及合成,并连接于原核表达载体pGEX-4T-1中,转化大肠杆菌Origami B(DE3)菌株,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,获得GST-p50融合蛋白。聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果显示,GST-p50蛋白主要以可溶形式高效表达。经谷胱甘肽S转移酶(GST)磁珠纯化及蛋白免疫印迹(western blot)鉴定,所表达的GST-p50蛋白具有良好的反应原性。研究结果为进一步开展兔NF-κB互作蛋白及信号通路的研究奠定了基础。
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关 键 词: | NF-κB p50蛋白 原核表达 鉴定 兔 |
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