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无乳链球菌对奶牛乳腺成纤维细胞金属蛋白酶及uPA系统表达的影响
引用本文:陈旭楠,丁玉林,张媛媛,李慧娟,王凤龙.无乳链球菌对奶牛乳腺成纤维细胞金属蛋白酶及uPA系统表达的影响[J].中国动物检疫,2021,38(5):76-87.
作者姓名:陈旭楠  丁玉林  张媛媛  李慧娟  王凤龙
基金项目:国家自然科学基金项目(31460642)
摘    要:为研究无乳链球菌(Streptococcus agalactiae,S. agalactiae)作用奶牛乳腺成纤维细胞(BMFBs)后对MMPs/TIMPs与uPA系统(uPA/PAI-1)表达的影响,以进一步阐明MMPs/TIMPs与uPA系统在调控细胞外基质(ECM)代谢的作用,将107 cfu/mL热灭活S. agalactiae菌液作用于BMFBs,在作用后不同时间点(6、12、24、48 h)通过RT-qPCR和Western Blot检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2、uPA、PAI-1 mRNA转录水平和相应蛋白表达水平,并用明胶酶谱法检测MMP-2、MMP-9的酶活性。结果显示:热灭活S. agalactiae作用后,MMP-9、TIMP-2、uPA、PAI-1 mRNA转录水平均有不同程度下降趋势,但MMP-2 mRNA水平上调,TIMP-1mRNA水平呈先上升后下降趋势;明胶酶谱法检测MMP-2的酶活性较MMP-9明显,二者均在作用6 h、48 h活性最强;MMP-2和MMP-9蛋白表达水平与对照组相比主要呈先升高后下降趋势,但在作用后期MMP-2蛋白表达又出现了回升趋势;TIMP-1蛋白水平与对照组相比主要呈先下降后上升趋势,在作用前期与MMP-9蛋白表达相反,TIMP-2蛋白表达与对照组相比呈上升趋势;uPA和PAI-1蛋白水平与对照组相比均呈先降低后升高再降低趋势,均在24h达到峰值,随后呈下降趋势。研究表明,热灭活S. agalactiae菌液可诱导BMFBs中MMPs/TIMPs表达,影响uPA系统参与调控MMPs的表达及活性。

关 键 词:无乳链球菌  成纤维细胞  MMP-2  MMP-9  TIMP-1  TIMP-2  uPA  PAI-1

The Effect of Inactivated S. agalactiae on Metalloproteinase and uPA System Expression in BMFBs
Chen Xunan,Ding Yulin,Zhang Yuanyuan,Li Huijuan,Wang Fenglong.The Effect of Inactivated S. agalactiae on Metalloproteinase and uPA System Expression in BMFBs[J].China Journal Of Animal Quarantine,2021,38(5):76-87.
Authors:Chen Xunan  Ding Yulin  Zhang Yuanyuan  Li Huijuan  Wang Fenglong
Abstract:
Keywords:
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