| 猪伪狂犬病毒gE基因主要表位区的表达及gE-ELISA方法的建立 |
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| 引用本文： | 乃德合,周拉.猪伪狂犬病毒gE基因主要表位区的表达及gE-ELISA方法的建立[J].畜牧与兽医,2014(3):87-90. |
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| 作者姓名： | 乃德合 周拉 |
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| 作者单位： | 青海省黄南州泽库县泽曲镇兽医站;青海省黄南州泽库县宁秀乡兽医站 |
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| 摘 要： | 根据GenBank中登录的猪伪狂犬病毒(PRV)gE基因序列,设计特异性表达引物,扩增gE富含B细胞表位的一段编码序列。扩增片段通过BamH I和Sal I酶切位点插入表达载体pET-30a。序列测定表明,重组表达质粒所含的gE基因读码框正确。重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)pLys,经IPTG诱导表达目的蛋白。表达产物经SDS-PAGE和Western blot检测表明,gE基因主要表位区成功地在大肠杆菌表达,表达产物约为28 ku的融合蛋白,能与PRV感染动物血清发生特异性反应,具有良好的反应原性。以纯化的gE蛋白为包被抗原,建立了ELISA检测方法。本试验为我国实施伪狂犬病的扑灭计划提供了必要的手段。
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| 关 键 词： | 伪狂犬病病毒 gE基因 原核表达 |
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