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| 猪白细胞介素-2重组蛋白的原核表达及其生物学活性分析 | |
| 引用本文： | 宋世斌.猪白细胞介素-2重组蛋白的原核表达及其生物学活性分析[J].畜牧兽医杂志,2015(3):34-38. |
| 作者姓名： | 宋世斌 |
| 作者单位： | 甘肃农业职业技术学院 |
| 摘 要： | 用已构建好的重组表达载体pET30-IL2转化BL-21E.coli,挑取单克隆,利用诱导剂IPTG诱导表达;通过改变诱导剂的浓度、诱导的时间来摸索最佳诱导条件,在最佳诱导条件下大量表达,并利用镍层析柱纯化重组蛋白,用MTS法测定其生物学活性。结果表明,表达产物经SDS-PAGE分析,表达出25ku的融合蛋白,表达产物主要以包涵体的形式存在,最佳的诱导剂浓度为0.1mM,最佳的诱导时间为4h;对表达产物的包涵体处理后,用镍琼脂糖凝胶FF纯化,所得蛋白的纯度约在90%以上。通过透析除去部分尿素,复性后在体外利用MTS法检测其生物学特性,结果表明其仍具有较好的生物学活性,这为进一步大量制备和研究猪IL-2重组蛋白奠定了基础。 |
| 关 键 词： | 猪白细胞介素2 原核表达 纯化 活性分析 |
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