| 绿脓杆菌外毒素A受体结合区蛋白基因重组与鉴定 |
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| 引用本文： | 万忠海,王景林,江禹,刘晓明,何畅,朱平.绿脓杆菌外毒素A受体结合区蛋白基因重组与鉴定[J].中国兽医学报,2002,22(6):571-573. |
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| 作者姓名： | 万忠海 王景林 江禹 刘晓明 何畅 朱平 |
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| 作者单位： | 解放军军需大学,军事兽医研究所,吉林,长春,130062 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 ( 39770 86 6 ) |
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| 摘 要： | 为了获得高表达量重组绿脓杆菌外毒素 A(PEA)受体结合区蛋白 ,以用作免疫原 ,从含有目的片段 (10 0 0 bp)的 p ET- 2 0 (b) B1 0 质粒切下目的片段 ,以正确阅读框架插入含有 T7lac启动子的 p ET- 2 8c( ) DNA中 ,构建了p ET- 2 8c( ) B1 0 质粒。用该质粒转化大肠杆菌 BL2 1 (DE3 )、BL2 1 (DE3 ) p L y S,经 IPTG诱导 ,BL2 1 (DE3 ) p L y S能高效表达目的蛋白。 SDS- PAGE、Western blot分析证实 ,该蛋白即是所需的蛋白 ,该重组蛋白占菌体总蛋白的 5 8%。
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| 关 键 词： | 绿脓杆菌外毒素A 受体结合区 基因重组 鉴定 |
| 文章编号： | 1005-4545(2002)06-0571-02 |
| 修稿时间： | 2001年6月7日 |
Recombination and Identification of PEA Receptor Binding Subunit Gene |
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| WAN Zhong-hai,WANG Jing-lin,JIANG Yu,LIU Xiao-ming,HE Chang,ZHU Ping.Recombination and Identification of PEA Receptor Binding Subunit Gene[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2002,22(6):571-573. |
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| Authors: | WAN Zhong-hai WANG Jing-lin JIANG Yu LIU Xiao-ming HE Chang ZHU Ping |
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| Abstract: | For the purpose of obtaining a high level expression of recombinant protein of the receptor binding domain of pseudomonas exotoxin A (PEA),the vector pET-28c( )B 10 that can express the peptide was constructed.The target gene-B 10 was cut out from pET-20(b) B 10,then it was inserted in pET-28c( ) DNA just follow the T 7 lac promotor.The recombinant plasmid pET-28c( )B 10 was transmitted into E.coli BL 21(DE 3) and BL 21(DE 3)pLyS.The strains BL 21(DE 3)pLyS can express the target protein at high level.By SDS-PAGE and Western-blot the protein was proved to be the target protein,it accounts for 58% of the total amount of the bacteria protein. |
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| Keywords: | PEA receptor binding gene recombination identification |
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