| 巴西橡胶树 ‘热研 7-33-97’ 单染色体显微分离与扩增 |
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| 引用本文： | 陈学俊,王英,庄南生,高和琼.巴西橡胶树 ‘热研 7-33-97’ 单染色体显微分离与扩增[J].中国农学通报,2014,30(13):29-33. |
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| 作者姓名： | 陈学俊 王英 庄南生 高和琼 |
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| 作者单位： | 1. 海南大学农学院2. 海南大学农学院生物技术系3. 海南大学农学院(儋州校区)生物技术系4. |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目;海南省高等学校科学研究项目 |
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| 摘 要： | 巴西橡胶树是天然橡胶的重要来源。而染色体显微分离技术对基因组研究有重要意义。本研究以巴西橡胶树‘热研7-33-97’幼叶为材料,采用酶解去壁低渗法制片,建立了微细玻璃针法分离巴西橡胶树单条染色体技术体系。成功分离出8条染色体;随机选取其中2条进行了2轮LA-PCR扩增,得到400-1800 bp之间的DNA片段,通过Southern blot杂交对LA-PCR产物进行验证,结果表明扩增片段与巴西橡胶树基因组DNA之间有同源性。从而说明单染色体DNA已被成功的扩增。这就证明利用染色体微分离、微克隆技术对巴西橡胶树基因组进行研究是可行的。为构建巴西橡胶树单染色体文库奠定了基础。
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| 关 键 词： | 巴西橡胶树 单染色体 显微分离 |
| 收稿时间： | 2013/10/28 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2013/12/24 0:00:00 |
Isolation and Amplification of Single Chromosome in Hevea brasiliensis RY7-33-97 |
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| Institution: | Chen Xuejun, Wang Ying, Gao Heqiong, Zhuang Nansheng (1.Agricultural College of Hainan University, Haikou 570228; 2.Key of Protection and Development Utilization of Tropical Crop Germplasm Resources (Hainan University), Ministry of Education, Haikou 570228) |
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| Abstract: | In present paper, we establish a method for single chromosome microdissection and microcloning in Hevea brasiliensis RY-7-33-97. Eight chromosomes were successfully isolated by micromanipulation with glass needles, and two of them were amplified by linker adaptormediated PCR( LA-PCR) for two rounds. Southern blot hybridization with DIG-dUTP labeled probes confirmed that the LA-PCR products were from Hevea brasiliensis genome. This result would have a profound effect on the construction of single chromosomal DNA library of Hevea brasiliensis. |
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| Keywords: | Microdissection |
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