| 甘蔗宿根矮化病病原菌一推测膜蛋白基因(Lxx18460)单克隆抗体的制备和检测 |
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| 引用本文： | 邵敏,张小秋,张琨琨,杨丽涛,李杨瑞.甘蔗宿根矮化病病原菌一推测膜蛋白基因(Lxx18460)单克隆抗体的制备和检测[J].南方农业学报,2016(3):382-388. |
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| 作者姓名： | 邵敏 张小秋 张琨琨 杨丽涛 李杨瑞 |
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| 作者单位： | 1. 广西大学 农学院/亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室,南宁,530005;2. 广西大学 农学院/亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室,南宁530005;中国农业科学院 甘蔗研究中心/广西农业科学院/农业部广西甘蔗生物技术与遗传改良重点实验室/广西甘蔗遗传改良重点实验室,南宁530007 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31360293)，国家国际科技交流与合作项目(2013DFA31600)，广西自然科学基金项目(2012GXNS-FDA053011) |
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| 摘 要： | 【目的】对甘蔗宿根矮化病病原菌(Leifsonia xyli subsp.xyli,Lxx)一推测为抗K因子的膜蛋白基因(Lxx18460)进行研究,为今后研究该基因在感病甘蔗体内表达打下基础。【方法】诱导表达并纯化含有推测为抗K因子的膜蛋白Lxx18460基因的p ET-30a质粒菌液,委托南京金斯瑞生物科技有限公司制备单克隆抗体;用Western blotting对细菌及感病和健康甘蔗样品总蛋白进行检测。【结果】Lxx18460基因具有特异性,只存在于甘蔗Lxx中。ELISA单克隆抗体效价大于1∶512000,能够灵敏地检测细菌总蛋白和甘蔗样品蛋白。Western blotting检测结果表明,Lxx18460基因在细菌中和感病甘蔗样品中表达,在健康甘蔗样品中几乎不表达。【结论】Lxx18460基因具有特异性,是Lxx中的抗K因子的膜蛋白基因,能够在细菌和感病甘蔗样品体外进行表达。
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| 关 键 词： | 甘蔗宿根矮化病 Lxx18460基因 单克隆抗体 ELISA检测 Western blotting检测 |
Preparation and detection for monoclonal antibody of speculative membrane protein gene(Lxx18460) from Leifsonia xyli subsp.xyli |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | ratoon stunting disease Lxx18460 gene monoclonal antibody ELISA detection Western blotting detection |
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