|
|||||
|
|
| 基于酿酒酵母的多片段质粒的构建 | |
| 引用本文： | 汤雅萍,程毅,王吐虹,陈佳,高春生,郭利桃,宋志强,唐超,严准,李智敏.基于酿酒酵母的多片段质粒的构建[J].湖南农业大学学报(自然科学版),2023,49(4):421-427. |
| 作者姓名： | 汤雅萍 程毅 王吐虹 陈佳 高春生 郭利桃 宋志强 唐超 严准 李智敏 |
| 作者单位： | 中国农业科学院麻类研究所，湖南 长沙 410205 |
| 基金项目： | 中国农业科学院科技创新工程(ASTIP–IBFC–04)；湖南省自然科学基金项目(2015JJ3128)；湖南省植保植检站植物防疫防控科研项目(HNZB202104) |
| 摘 要： | 为避免现有的多片段质粒构建技术的弊端，提高多片段质粒构建效率，以构建树干毕赤酵母Agglutinin-like基因的敲除载体为例，利用酿酒酵母活体细胞重组系统，一次性将多个外源DNA片段和线性化质粒重组，形成环状质粒。通过引物设计在相互连接的DNA片段之间引入50bp重叠序列，用PCR扩增DNA片段后，与线性化质粒一起转化酿酒酵母，再用PCR和测序等方法鉴定阳性酵母菌落中质粒的正确性。通过本方法构建的多片段质粒正确率高、耗时短。 |
| 关 键 词： | 质粒构建 多片段质粒 酵母同源重组系统 |
| 点击此处可从《湖南农业大学学报(自然科学版)》浏览原始摘要信息 | |
| 点击此处可从《湖南农业大学学报(自然科学版)》下载免费的PDF全文 | |