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大豆rbcS基因启动子的克隆及在转基因烟草中的功能缺失分析
引用本文:崔喜艳,陈众峰,范 贝,等.大豆rbcS基因启动子的克隆及在转基因烟草中的功能缺失分析[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2015,43(5):114-121,128.
作者姓名:崔喜艳  陈众峰  范 贝  
作者单位:吉林农业大学 生命科学学院,吉林农业大学 生命科学学院,吉林农业大学 生命科学学院
基金项目:国家自然科学基金项目(31171459);吉林省自然科学基金项目(201215178)
摘    要:【目的】进一步验证栽培大豆rbcS基因启动子功能,为植物基因工程相关研究提供启动子资源。【方法】从栽培大豆中克隆了rbcS基因5′端上游1 538bp的DNA序列,根据光诱导表达调控元件及顺式作用功能元件所在的位置,设计含1 089,712和190bp 3个5′端缺失体,并将rbcS基因启动子(1 538bp)及3个5′端系列缺失体序列分别与gus基因融合,构建植物表达载体并命名为pGmrbcS、pA、pB和pC,用农杆菌介导法转化烟草,通过gus基因活性变化检测不同缺失体的表达特性。【结果】克隆了1 538bp的大豆rbcS基因启动子序列及1 089,712和190bp的5′端缺失体启动子片段。GUS活性检测表明,在pGmrbcS转基因烟草的叶中GUS活性最高,且与pCAMBIA1301转基因烟草叶片中CaMV35S启动子驱使gus基因的表达量相当,而茎、根中GUS活性较低。GUS定量分析表明,T1代转基因烟草光下培养时,3种缺失体启动子叶片中的GUS表达活性均与CaMV35S启动子相当,其中pB活性最高,是CaMV35S启动子活性的1.4倍,pA、pC活性低于pB,分别为pB活性的84%和71%;含pA的转基因烟草于黑暗中萌发的幼苗叶片gus基因不表达,光下萌发幼苗叶片有gus基因表达,而含有pB、pC的转基因烟草,在黑暗和光下萌发的幼苗叶片中均有gus基因表达,且表达量以pB最高。【结论】含有长度为1 089bp(pA)光诱导元件的rbcS基因缺失体启动子具有光诱导和组织特异表达特性,长度为712bp(pB)的缺失体启动子的启动活性最高。

关 键 词:大豆  rbcS基因启动子  转基因烟草  功能缺失
收稿时间:2014/4/24 0:00:00

Cloning of rbcS gene promoter from Glycine max and dysfunctional analysis in transgenic tobacco
CUI Xi-yan,CHEN Zhong-feng and FAN Bei,et al.Cloning of rbcS gene promoter from Glycine max and dysfunctional analysis in transgenic tobacco[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2015,43(5):114-121,128.
Authors:CUI Xi-yan  CHEN Zhong-feng and FAN Bei  
Abstract:
Keywords:Glycine max  rbcS gene promoter  transgenic tobacco  function deletion
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