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胁迫条件下毛竹miR164b及其靶基因PeNAC1表达研究
引用本文:王丽丽,赵韩生,孙化雨,董丽莉,娄永峰,高志民.胁迫条件下毛竹miR164b及其靶基因PeNAC1表达研究[J].林业科学研究,2015,28(5):605-611.
作者姓名:王丽丽  赵韩生  孙化雨  董丽莉  娄永峰  高志民
作者单位:国际竹藤中心, 竹藤科学与技术重点开放实验室, 北京 100102;国际竹藤中心, 竹藤科学与技术重点开放实验室, 北京 100102;国际竹藤中心, 竹藤科学与技术重点开放实验室, 北京 100102;国际竹藤中心, 竹藤科学与技术重点开放实验室, 北京 100102;国际竹藤中心, 竹藤科学与技术重点开放实验室, 北京 100102;国际竹藤中心, 竹藤科学与技术重点开放实验室, 北京 100102
基金项目:国家科技支撑计划专题"分子辅助育种技术集成与示范"(2012BAD23B0504)、国际竹藤中心基本科研业务费专项资金项目"毛竹快速生长期特异转录调控网络的构建及其应用"(1632015008)、国家林业局948项目"小分子RNA分离技术引进"(2011-4-55)。
摘    要:MicroRNAs(miRNAs)在植物生长发育以及抗逆等过程中起着重要的调控作用。miR164 作为植物特有的miRNA,其主要的靶基因是植物NAC转录因子。为揭示毛竹 miR164 对其靶基因的调控机制,通过茎环引物法和RT-PCR技术,从毛竹(Phyllostachys edulis)中克隆出miR164b成熟序列及其靶基因PeNAC1。序列分析表明miR164b的靶点位于PeNAC1 编码区,RLM-5'RACE PCR产物测序结果证实切割位点位于靶点的第10-11位碱基之间。组织特异性表达分析表明,毛竹 miR164bPeNAC1在根、茎、叶及鞘中均表达,其中miR164b在根中表达丰度最高,在茎中表达丰度最低;而PeNAC1的表达丰度恰好与miR164b 相反。实时定量PCR结果显示,NaCl(250 mmol·L-1)、低温(4℃)和强光(1 500 μmol·m-2·s-1)处理后毛竹叶片中 miR164b 的表达均明显下调,GA3(100 μmol·L-1)处理后 miR164b表达量明显上调;而在同样处理条件下,PeNAC1的表达恰好呈现出与其完全相反的趋势。由此表明,miR164b对靶基因PeNAC1 具有表达调控作用,可能与毛竹响应非生物胁迫的抗逆过程密切相关,这为利用miRNA开展竹子抗逆分子育种提供了参考。

关 键 词:毛竹  miRNA  NAC转录因子  非生物胁迫
收稿时间:2014/7/31 0:00:00

Expression Analysis of miR164b and Its Target Gene PeNAC1 in Phyllostachys edulis under Stress
WANG Li-li,ZHAO Han-sheng,SUN Hua-yu,DONG Li-li,LOU Yong-feng and GAO Zhi-min.Expression Analysis of miR164b and Its Target Gene PeNAC1 in Phyllostachys edulis under Stress[J].Forest Research,2015,28(5):605-611.
Authors:WANG Li-li  ZHAO Han-sheng  SUN Hua-yu  DONG Li-li  LOU Yong-feng and GAO Zhi-min
Institution:International Center for Bamboo and Rattan, Key Laboratory on the Science and Technology of Bamboo and Rattan, Beijing 100102, China;International Center for Bamboo and Rattan, Key Laboratory on the Science and Technology of Bamboo and Rattan, Beijing 100102, China;International Center for Bamboo and Rattan, Key Laboratory on the Science and Technology of Bamboo and Rattan, Beijing 100102, China;International Center for Bamboo and Rattan, Key Laboratory on the Science and Technology of Bamboo and Rattan, Beijing 100102, China;International Center for Bamboo and Rattan, Key Laboratory on the Science and Technology of Bamboo and Rattan, Beijing 100102, China;International Center for Bamboo and Rattan, Key Laboratory on the Science and Technology of Bamboo and Rattan, Beijing 100102, China
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