葡萄逆境胁迫诱导启动子的克隆及表达分析 |
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引用本文: | 吕兆勇,赵春梅,薛仁镐.葡萄逆境胁迫诱导启动子的克隆及表达分析[J].华北农学报,2016(1):77-82. |
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作者姓名: | 吕兆勇 赵春梅 薛仁镐 |
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作者单位: | 1. 聊城市人民医院,山东 聊城,252000;2. 青岛农业大学 生命科学学院,山东 青岛,266109 |
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基金项目: | 转基因生物新品种培育重大专项(2014ZX08010002-003-002);山东省自然科学基金项目(ZR2013CM025) |
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摘 要: | 为了研究葡萄抗逆基因(CAN70200.1)的表达特性,采用PCR技术从葡萄中克隆了CAN70200.1基因上游一段长度为1 354 bp的启动子片段,命名为PCAN。采用Plant CARE和PLACE启动子在线预测工具分析表明,PCAN启动子序列具有CAAT-box、TATA-box基本的顺式作用元件和一些参与非生物胁迫、光和植物激素应答相关的顺式作用元件。为验证启动子的表达特性,将PCAN启动子连接到p CAMBIA1391Z载体GUS基因的上游,构建成植物表达载体p1391Z-CAN,并通过农杆菌介导法转化烟草,经PCR鉴定,获得转基因植株。对转基因烟草植株进行逆境胁迫处理发现,在干旱处理120 min后,PCAN启动子活性达到最强;而4℃低温处理30~60 min时,PCAN启动子活性达到最强,表明PCAN启动子具有低温和干旱胁迫诱导表达特性。
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关 键 词: | 葡萄 PCAN启动子 胁迫诱导表达 GUS 检测 |
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