蛹虫草CmKexin基因克隆和菌丝体中表达检测 |
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引用本文: | 毛玉梅,李琴,付鸣佳,金华燕,沈俊良,钟雪晴.蛹虫草CmKexin基因克隆和菌丝体中表达检测[J].华北农学报,2016(4):112-118. |
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作者姓名: | 毛玉梅 李琴 付鸣佳 金华燕 沈俊良 钟雪晴 |
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作者单位: | 江西师范大学 生命科学学院,江西 南昌,330022 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(31060004;31260010) |
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摘 要: | 为了探讨蛹虫草类枯草杆菌蛋白酶(Subtilisin-like protease)的表达特性,以真菌蛹虫草菌丝体为研究对象,通过RT-PCR获得蛹虫草CmKexin基因的ORF序列,并进行序列分析。应用Northern杂交和Real-time PCR方法,检测蓝光照射后蛹虫草菌丝体中CmKexin基因的转录情况。结果获得蛹虫草CmKexin基因的ORF序列。对翻译蛋白质产物CmKexin进行生物信息学分析,表明该蛋白质含1个属蛋白转化酶的肽酶S8家族功能域(143~429)和1个前体蛋白转化酶P功能域(514~600),符合真菌类枯草杆菌蛋白酶的特征。蛹虫草菌丝体在黑暗预培养4 d后再蓝光照射,Northern Blotting和Real-time PCR检测均可得到相同的结果,即在持续的蓝光照射48~50 h时,出现CmKexin基因的瞬时大量转录。而其他时间内均未检测到该基因的大量转录。试验结果将为蛹虫草类枯草杆菌蛋白酶的利用提供理论依据。
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关 键 词: | 蛹虫草 CmKexin 基因 类枯草杆菌蛋白酶 Northern 杂交 实时荧光定量 PCR |
Clone of Gene CmKexin of Cordyceps militaris and Its Detection of Expression in Mycelium |
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Abstract: | |
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Keywords: | Cordyceps militaris CmKexin gene Subtilisin-like protease Northern Blotting Real-time PCR |
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