| 基于CRISPR/Cas9系统分析草地贪夜蛾Wnt1基因的生物学功能 |
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| 引用本文： | 付晓政,李瑞,邱琪琪,王梦珂,赵特,周琳.基于CRISPR/Cas9系统分析草地贪夜蛾Wnt1基因的生物学功能[J].植物保护学报,2023,50(1):59-70. |
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| 作者姓名： | 付晓政 李瑞 邱琪琪 王梦珂 赵特 周琳 |
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| 作者单位： | 河南农业大学植物保护学院, 河南省新型农药创制与应用重点实验室, 河南省绿色农药创制工程技术研究中心, 郑州 450002 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划(2018YFD0200600);河南省花生产业技术体系(S2012-05-G06) |
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| 摘 要： | 为明确草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda中Wnt1基因的生物学功能，采用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)技术检测草地贪夜蛾胚胎发育期Wnt1基因的表达谱，利用CRISPR/Cas9系统对Wnt1基因进行定向敲除，并通过qPCR技术检测草地贪夜蛾Wnt1基因缺失突变体中与昆虫发育相关基因的表达水平。结果显示，Wnt1基因在草地贪夜蛾整个胚胎发育期均有表达，在胚胎发育早期（6 h）表达水平最高。将SfWnt1-sgRNA和Cas9蛋白混合注入草地贪夜蛾卵中，胚胎死亡率明显升高，同时获得了Wnt1基因缺失的草地贪夜蛾突变体。突变率与注射浓度相关，注射浓度越高，突变率越高；当SfWnt1-sgRNA和Cas9蛋白混合后终浓度均为300 ng/μL时，注射的724粒卵中获得体节缺陷突变体52头，附肢缺陷突变体64头，组织特化突变体20头；SfWnt1-sg RNA和Cas9蛋白混合后终浓度均为100 ng/μL时，注射的413粒卵中最终获得体节缺陷突变体14头，附肢缺陷突变体22头，组织特化突变体7头；这些突变体均无法存活至化...
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| 关 键 词： | Wnt1基因 草地贪夜蛾 CRISPR/Cas9系统 胚胎发育 |
| 收稿时间： | 2021/3/1 0:00:00 |
Biological function of fall armyworm Spodoptera frugiperda Wnt1 gene based on the CRISPR/Cas9 system |
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| FU Xiao-zheng,LI Rui,QIU Qi-qi,WANG Meng-ke,ZHAO Te,ZHOU Lin.Biological function of fall armyworm Spodoptera frugiperda Wnt1 gene based on the CRISPR/Cas9 system[J].Acta Phytophylacica Sinica,2023,50(1):59-70. |
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| Authors: | FU Xiao-zheng LI Rui QIU Qi-qi WANG Meng-ke ZHAO Te ZHOU Lin |
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| Institution: | Henan Provincial Research Center for Green Pesticide Creation Engineering Technology, Henan Provincial Key Laboratory of New Pesticide Creation and Application, Department of Plant Protection, Henan Agricultural University, Zhengzhou 450002, Henan Province, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Wnt1 gene Spodoptera frugiperda CRISPR/Cas9 system embryonic development |
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