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捻转血矛线虫PCR检测方法的建立及其应用
引用本文:邹 敏,要慧中,杨冰可,周璐露,赵光明,杨文欢,吴 昌,林 青.捻转血矛线虫PCR检测方法的建立及其应用[J].西北农业学报,2023(1):139-144.
作者姓名:邹 敏  要慧中  杨冰可  周璐露  赵光明  杨文欢  吴 昌  林 青
作者单位:(1. 西北农林科技大学 动物医学院,陕西杨凌 712100;2. 陕西省动物疫病预防控制中心,西安 710299;3. 商南县农业综合执法大队,陕西商南 726300;4. 家畜疫病病原生物学国家重点实验室,中国农业科学院 兰州兽医研究所,兰州 730046)
基金项目:陕西省重点研发计划项目(2020NY-017);陕西省农业农村厅省级农业专项资金项目(畜牧专项资金-XN14);西北农林科技大学大学生创新创业训练计划项目(X202010712098);家畜疫病病原生物学国家重点实验室(中国农业科学院兰州兽医研究所)开放课题资助项目(SKLVEB2019KFKT007)。
摘    要:为了能从粪便中对捻转血矛线虫卵进行特异性检测,基于捻转血矛线虫ITS2-28S基因序列设计特异性引物,通过对退火温度反应条件优化,建立捻转血矛线虫特异性PCR检测方法。结果显示,该方法成功从捻转血矛线虫卵中扩增出约270 bp的特异性片段,其最低检出质量浓度为0.298 pg/μL,敏感性较高;进一步对捻转血矛线虫、细颈线虫、粗纹食道口线虫等多种线虫的虫卵DNA样品进行扩增,该方法仅能特异性扩增出捻转血矛线虫卵的目的片段,证明特异性良好。利用所建立的PCR检测方法对120只山羊的粪便样品进行检测,显示受检样品中捻转血矛线虫阳性率为38.3%,高于显微镜检测结果(阳性率为24.2%)。结果表明,该研究建立的PCR方法能够应用于临床检测山羊粪便样品中的捻转血矛线虫卵,可为山羊捻转血矛线虫病的诊断与防治提供有效技术支持。

关 键 词:山羊  捻转血矛线虫  聚合酶链反应  ITS2-28S基因  虫卵检测

Establishment of PCR Method for Detection of Haemonchus contortus and Its Application
ZOU Min,YAO Huizhong,YANG Bingke,ZHOU Lulu,ZHAO Guangming,YANG Wenhuan,WU Chang and LIN Qing.Establishment of PCR Method for Detection of Haemonchus contortus and Its Application[J].Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica,2023(1):139-144.
Authors:ZOU Min  YAO Huizhong  YANG Bingke  ZHOU Lulu  ZHAO Guangming  YANG Wenhuan  WU Chang and LIN Qing
Abstract:
Keywords:Goats  Haemonchus contortus  Polymerase chain reaction  ITS2-28S genes  Eggs detection
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