| IBRV重组gD蛋白的真核表达与间接ELISA检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 郭宇,杨波,兰德松,郁茵,杨冬梅,王旭红,云涛,牧仁,李雷斌,孙雨.IBRV重组gD蛋白的真核表达与间接ELISA检测方法的建立[J].中国动物检疫,2023,40(2):139-145. |
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| 作者姓名： | 郭宇 杨波 兰德松 郁茵 杨冬梅 王旭红 云涛 牧仁 李雷斌 孙雨 |
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| 作者单位： | 1. 内蒙古自治区动物疫病预防控制中心;2. 鄂尔多斯市动物疫病预防控制中心;3. 辽宁省动物疫病预防控制中心;4. 北京市密云区动物疫病预防控制中心;5. 广西大学动物科学技术学院;6. 中国动物疫病预防控制中心 |
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| 基金项目： | 农业农村部跨境动物疫病防控机制建设项目（2130114-FK）；现代农业产业体系建设专项（CARS39） |
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| 摘 要： | 通过优化牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）gD基因序列为Sf9细胞偏好密码子，转座形成穿梭载体，将质粒瞬时转染Sf9昆虫细胞，利用昆虫杆状病毒表达系统表达纯化重组IBRV gD蛋白；以制备的重组IBRV gD蛋白为包被抗原，建立检测IBRV血清中和抗体的间接ELISA方法，并通过比对检测已知血清中和抗体效价的牛血清，验证所建立的间接ELISA方法的敏感性、特异性与重复性等指标。结果显示：本研究建立的间接ELISA方法对相关的牛病毒血清抗体无交叉反应，敏感性可达1:512，组内和组间变异系数均低于10%；使用建立的间接ELISA检测方法结合血清中和试验，对480份临床血清样品进行检测，发现两者敏感性符合率为98.18%，特异性符合率为93.33%，总符合率为96.67%。结果表明，本研究建立的检测IBRV血清中和抗体的间接ELISA方法具有良好的特异性、敏感性和重复性，可开发为临床适应的检测试剂盒。
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| 关 键 词： | 重组IBRV gD蛋白 杆状病毒 真核表达 蛋白纯化 间接ELISA |
Eukaryotic Expression of IBRV Recombinant gD Protein and Development of an Indirect ELISA Assay |
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| Guo Yu,Yang Bo,Lan Desong,Yu Yin,Yang Dongmei,Wang Xuhong,Yun Tao,Mu Ren,Li Leibin,Sun Yu.Eukaryotic Expression of IBRV Recombinant gD Protein and Development of an Indirect ELISA Assay[J].China Journal Of Animal Quarantine,2023,40(2):139-145. |
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| Authors: | Guo Yu Yang Bo Lan Desong Yu Yin Yang Dongmei Wang Xuhong Yun Tao Mu Ren Li Leibin Sun Yu |
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