| 企鹅珍珠贝镉金属硫蛋白的分离纯化及其多克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 吴晓萍,廖爱琳,章超桦,廖艳,卢虹玉,杨捷.企鹅珍珠贝镉金属硫蛋白的分离纯化及其多克隆抗体的制备[J].水产学报,2011,35(6):816-823. |
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| 作者姓名： | 吴晓萍 廖爱琳 章超桦 廖艳 卢虹玉 杨捷 |
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| 作者单位： | 1. 广东海洋大学食品科技学院,广东,湛江,524025
2. 广东海洋大学现代生化中心,广东,湛江,524088 |
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| 基金项目： | 现代农业产业技术体系（CARS-48-07B）;广东省科厅农业攻关项目（2010B 020313005）;广东海洋大学自然科学基金（2010） |
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| 摘 要： | 镉—金属硫蛋白(Cd-MT)是水生环境中重金属镉污染的重要生物标志物,对该蛋白的研究不仅有利于Cd-MT免疫学检测方法的建立,也为水生环境重金属污染监测技术的开发提供理论依据。采用不同浓度CdCl2(0～0.8 mg/L)胁迫诱导企鹅珍珠贝合成Cd-MT,通过组织捣碎、冷冻离心、热处理、Sephadex G-50凝胶柱层析等方法从企鹅珍珠贝全脏器中纯化得到Cd-MT。紫外吸收显示,在CdCl2浓度为0.8 mg/L时,MT粗提液中的Cd-MT特征吸收最大,表明贝体内的Cd-MT含量随着CdCl2胁迫浓度的增大而增加。SDS-PAGE显示纯化后的Cd-MT及其二聚体分子量约为9 ku和18 ku。采用戊二醛法将获得的Cd-MT与牛血清白蛋白(BSA)偶联后免疫家兔,制备了兔抗企鹅珍珠贝Cd-MT多克隆抗血清。通过间接ELISA法检测其抗血清效价为1∶12 800。经饱和硫酸铵法和DEAE-Sephadex A50亲和层析纯化得到分子量约为35 ku的高纯度免疫球蛋白G(IgG)。ELISA免疫鉴定显示,该IgG不仅能识别企鹅珍珠贝的Cd-MT,还与马氏珠母贝的Cd-MT有明显的免疫交叉反应。
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| 关 键 词： | 企鹅珍珠贝 镉金属硫蛋白 多克隆抗体 |
| 收稿时间： | 3/8/2011 11:38:47 PM |
| 修稿时间： | 4/27/2011 1:35:42 PM |
Purification and polyclonal antibody preparation of Cd-MT from Pteria penguin |
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| WU Xiao-ping,LIAO Ai-lin,ZHANG Chao-hu,LIAO Yan,LU Hong-yu and YANG Jie.Purification and polyclonal antibody preparation of Cd-MT from Pteria penguin[J].Journal of Fisheries of China,2011,35(6):816-823. |
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| Authors: | WU Xiao-ping LIAO Ai-lin ZHANG Chao-hu LIAO Yan LU Hong-yu and YANG Jie |
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| Institution: | College of Food Science and Technology,Guangdong Ocean University,College of Food Science and Technology,Guangdong Ocean University,College of Food Science and Technology,Guangdong Ocean University,Modern Bio-Chemical Laboratory Center, Guangdong Ocean University,College of Food Science and Technology, Guangdong Ocean University,Modern Bio-Chemical Laboratory Center,Guangdong Ocean University |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Pteria penguin Cd-MT polyclonal antibodies |
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