| 转 Cp4 epsps 基因大豆快速DAS-ELISA 检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 候吉超,李忠鹏,梁雨欣,张春雨,李小宇,王永志.转 Cp4 epsps 基因大豆快速DAS-ELISA 检测方法的建立[J].植物保护,2021,47(4):128-133. |
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| 作者姓名： | 候吉超 李忠鹏 梁雨欣 张春雨 李小宇 王永志 |
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| 作者单位： | 1. 吉林省农业科学院, 公主岭 136100; 2. 吉林农业大学食品科学与工程学院, 长春 130118 |
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| 基金项目： | 吉林省省级产业创新专项资金(2017C057-1); 吉林省科技厅重点研发项目(20180201084SF):转基因农产品快速检测试剂的研发与应用 |
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| 摘 要： | 为了快速检测转 Cp4 epsps 基因大豆, 本研究以纯化后的CP4-EPSPS单克隆抗体1D12为捕获抗体, 辣根过氧化物酶标记的羊抗CP4-EPSPS多克隆抗体8092为检测抗体, 通过优化抗体工作浓度和抗原抗体反应时间, 成功建立转 Cp4 epsps 基因大豆快速双抗夹心ELISA检测方法?结果显示:最佳检测条件为捕获抗体浓度10 μg/mL, 检测抗体浓度1.25 μg/mL, 样品与检测抗体先后加入酶标板37℃共同孵育60 min?该方法的检测范围为0.312 5~80 μg/mL, 待检叶片?籽粒最佳检测范围为10~80倍稀释; 板内变异系数为1.64%~5.42%, 板间变异系数为3.05%~9.13%, 符合ELISA定性试剂盒参考标准; 对100份大豆叶片?20份大豆籽粒进行检测, 与Western blot结果和标准结果进行比较, 符合率为100%, 表明该检测方法具有良好的准确性和重复性?该检测方法75 min内即可完成检测, 适用于快速检测转 Cp4 epsps 基因大豆, 为转 Cp4 epsps 基因快速检测试剂盒的开发奠定了基础?
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| 关 键 词： | CP4-EPSPS 双抗夹心ELISA 大豆 检测 |
| 收稿时间： | 2020/3/17 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2020/5/6 0:00:00 |
Establishment of rapid DAS-ELISA for detection of the Cp4 epsps transgenic soybean |
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| HOU Jichao,LI Zhongpeng,LIANG Yuxin,ZHANG Chunyu,LI Xiaoyu,WANG Yongzhi.Establishment of rapid DAS-ELISA for detection of the Cp4 epsps transgenic soybean[J].Plant Protection,2021,47(4):128-133. |
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| Authors: | HOU Jichao LI Zhongpeng LIANG Yuxin ZHANG Chunyu LI Xiaoyu WANG Yongzhi |
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| Institution: | 1. Jilin Academy of Agricultural Sciences, Gongzhuling 136100, China; 2. College of Food Science and Engineering, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | CP4-EPSPS double antibody sandwich ELISA (DAS-ELISA) soybean detection |
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