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实时荧光定量PCR检测鸡传染性贫血病毒方法的建立
引用本文:张太翔,王炳军,凌宗帅,李玉峰,高小博,田国宁,张金玲,韩亮,张丽萍.实时荧光定量PCR检测鸡传染性贫血病毒方法的建立[J].中国动物检疫,2009,26(11):58-60.
作者姓名:张太翔  王炳军  凌宗帅  李玉峰  高小博  田国宁  张金玲  韩亮  张丽萍
作者单位:1. 潍坊出入境检验检疫局,山东潍坊,261041
2. 济南出入境检验检疫局,山东济南,250010
3. 山东农科院家禽所,山东济南,250023
4. 北京盈九思科技发展有限公司,北京,100029
摘    要:建立了Taqman实时荧光定量PCR方法检测鸡传染性贫血病毒(CAV)。选取CAV病毒的序列设计引物和探针。以梯度稀释的含有CAV目的扩增片段的质粒作为标准品,进行定量PCR反应以确定检测灵敏度。2.0×105~2.0×102个拷贝,4个数量级的范围内定量PCR有"S"型扩增曲线,检测灵敏度为200个拷贝。根据病毒拷贝数与定量反应Ct值的关系,绘制了标准曲线。该方法具有特异性,对传染性支气管炎病毒、传染性法氏囊病毒、禽白血病病毒和马立克病毒核酸都没有扩增反应。采用实时荧光定量PCR方法检测试验感染鸡的肝脏、脾脏、肾脏、胸腺、法氏囊、泄殖腔棉拭子等样品,所有检测样品都有"S"型扩增曲线,且荧光信号值高。实时定量PCR检测CAV的方法,灵敏度高,特异性好,可以进行定量分析,在禽病的快速检测上具有重要意义。

关 键 词:鸡传染性贫血  实时荧光定量PCR  Taqman探针

Development of Real-time Fluorecent Ouantative PCR for the Detection of Chicken Infectious Anemia Virus
Zhang Taixiang,Wang Bingjun,Ling Zongshuai,Li Yufeng,Gao Xiaobo,Tian Guoning,Zhang Jinling,Han Liang,Zhang Liping.Development of Real-time Fluorecent Ouantative PCR for the Detection of Chicken Infectious Anemia Virus[J].China Journal Of Animal Quarantine,2009,26(11):58-60.
Authors:Zhang Taixiang  Wang Bingjun  Ling Zongshuai  Li Yufeng  Gao Xiaobo  Tian Guoning  Zhang Jinling  Han Liang  Zhang Liping
Abstract:
Keywords:
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