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禽流感病毒、新城疫病毒、猪瘟病毒和口蹄疫病毒多联RT-PCR诊断技术的建立
引用本文:刘维全,刘海鹏,江禹,王本旭,王吉贵,杨淑艳,孙绍光,涂长春,刘芃芃.禽流感病毒、新城疫病毒、猪瘟病毒和口蹄疫病毒多联RT-PCR诊断技术的建立[J].农业生物技术学报,2005,13(1):92-95.
作者姓名:刘维全  刘海鹏  江禹  王本旭  王吉贵  杨淑艳  孙绍光  涂长春  刘芃芃
作者单位:1. 中国农业大学生物学院,北京,100094
2. 沈阳农业大学畜牧兽医学院,沈阳,110161
3. 解放军军需大学军事兽医研究所,长春,130062
摘    要:选择禽流感病毒(AIV)、新城疫病毒(NDV)、猪瘟病毒(CSFV)和口蹄疫病毒(FMDV)基因组序列高保守区,按照多联PCR引物的设计要求,利用DNAsis计算机软件设计并合成了4对特异性扩增引物,扩增片段大小分别为470、320、200和140bp。以AIV、NDV、CSFV和FMDV的培养物提取RNA并反转录,进行RT-PCR特异性扩增。结果表明,各单项RT-PCR扩增产物与设计的4对引物之间的序列大小一致。在分别建立了各病毒单项RT-PCR及AIV与NDV、CSFV与FMDV二联RT-PCR的基础上,进一步优化各种多联PCR扩增条件,成功建立了上述4种病毒的四联RT-PCR技术。经特异性和灵敏度实验证明,本方法具有高度的特异性和灵敏性,其灵敏度为10pg总RNA。在3h内即可完成样品的检测。

关 键 词:CSFV  FMDV  口蹄疫病毒  猪瘟病毒  AIV  禽流感病毒  新城疫病毒  RT-PCR  特异性  扩增
修稿时间:2004年2月9日

Establishment of Multiple RT-PCR Diagnostic Techniques for Avian influenza virus (AIV), Newcastle disease virus (NDV), Classical swine fever virus (CSFV) and Food and mouth disease virus (FMDV)
LIU Wei-Quan,LIU Hai-Peng,JIANG Yu,WANG Ben-Xu,WANG Ji-Gui,YANG Shu-Yan,SUN Shao-Guang,TU Chang-Chun,LIU Peng-Peng.Establishment of Multiple RT-PCR Diagnostic Techniques for Avian influenza virus (AIV), Newcastle disease virus (NDV), Classical swine fever virus (CSFV) and Food and mouth disease virus (FMDV)[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2005,13(1):92-95.
Authors:LIU Wei-Quan  LIU Hai-Peng  JIANG Yu  WANG Ben-Xu  WANG Ji-Gui  YANG Shu-Yan  SUN Shao-Guang  TU Chang-Chun  LIU Peng-Peng
Abstract:
Keywords:
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