| 甜瓜半粒干种子DNA提取方法的优化 |
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| 引用本文： | 夏玲,梁昕景,王学林,杨小锋.甜瓜半粒干种子DNA提取方法的优化[J].南方农业学报,2019,50(7):1426-1431. |
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| 作者姓名： | 夏玲 梁昕景 王学林 杨小锋 |
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| 作者单位： | 三亚市南繁科学技术研究院,海南三亚,572000 |
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| 基金项目： | 海南省重大科技计划项目 |
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| 摘 要： | 目的]优化甜瓜半粒干种子DNA提取方法,为甜瓜相关分子研究提供技术支持.方法]以甜瓜半粒干种子为材料,比较改良CTAB法、SDS法、高盐低pH法和尿素法4种提取方法的DNA提取效果,并对改良CTAB法中的提取液CTAB浓度、裂解时间、苯酚抽提次数等进行优化,以琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计分别检测DNA的质量和纯度.最后通过SSR分析验证优化后改良CTAB法提取DNA的效果.结果]4种提取方法中,改良CTAB法提取的DNA提取率最高,且DNA质量和纯度均高于其他提取方法.优化得到改良CTAB法的最佳提取条件为:提取液CTAB浓度2%,裂解时间20 min,苯酚抽提1次先用苯酚/氯仿/异戊醇(25:24:1)抽提1次,再用氯仿/异戊醇(24:1)抽提1次].在此条件下,提取的甜瓜半粒干种子DNA质量和纯度较好,以此为模板进行SSR分子标记分析时,电泳条带稳定、清晰,基本无杂带,可清楚区分品种间的差异.结论]优化后的改良CTAB法提取甜瓜半粒干种子DNA效果较好,可满足甜瓜种子分子标记和遗传多样性分析等分子实验需求.
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| 关 键 词： | 甜瓜 干种子 DNA提取 CTAB法 优化 |
Optimization of DNA extraction method for half melon dry seeds |
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| XIA Ling,LIANG Xin-jing,WANG Xue-lin,YANG Xiao-feng.Optimization of DNA extraction method for half melon dry seeds[J].Journal of Southern Agriculture,2019,50(7):1426-1431. |
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| Authors: | XIA Ling LIANG Xin-jing WANG Xue-lin YANG Xiao-feng |
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| Keywords: | |
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