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| MBP-mCTCF融合蛋白原核表达载体的构建及表达 | |
| 作者单位： | ;1.山西农业大学生命科学学院 |
| 摘 要： | 为了构建鼠的CTCF与麦芽糖结合蛋白(MBP)融合蛋白的原核表达载体,并进行原核诱导表达及鉴定,以pMXs-3Flag-m CTCF为模板,PCR扩增得到mCTCF序列,目的基因片段EcoRI,SalI双酶切后连接到同样双酶切的pMal-C2G载体上,测序鉴定。将测序正确的质粒转化到E.coli BL21中,用IPTG诱导融合蛋白的表达,用SDS-PAGE分离检测蛋白表达效果。经菌液PCR、测序鉴定、双酶切鉴定证明,得到的重组质粒pMal-C2G-mCTCF构建成功,且成功诱导出了MBP-mCTCF融合蛋白,最佳诱导条件为:10×10~(-4) mol/L IPTG浓度在37℃诱导6 h。 |
| 关 键 词： | CTCF 质粒构建 原核诱导表达 |
Construction of Prokaryotic Expression Vector and Expression of MBP-mCTCF Fusion Protein |
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| Abstract: | |
| Keywords: | |
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