芒果炭疽病菌内切葡聚糖酶基因CgEg1B的克隆与敲除载体构建 |
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引用本文: | 张恺莉,刘晓妹.芒果炭疽病菌内切葡聚糖酶基因CgEg1B的克隆与敲除载体构建[J].中国果业信息,2017,46(1). |
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作者姓名: | 张恺莉 刘晓妹 |
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作者单位: | 海南大学环境与植物保护学院,海南大学环境与植物保护学院 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(面上项目,重点项目,重大项目) |
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摘 要: | 芒果炭疽病(Colletotrichum gloeosporioides)是为害芒果的重要病害之一,为了明确内切葡聚糖酶CgEg1B与芒果炭疽病菌致病力的关系,本实验以芒果炭疽病菌DNA为模板,利用同源克隆技术扩增CgEg1B,对其序列特征、蛋白的保守结构域进行分析,并借助In-Fusion?HD Cloning Kit技术进行敲除载体构建。结果表明,该基因DNA和cDNA全长分别为1077 bp、1020bp,编码区有1个内含子(大小为57bp),推测编码339个氨基酸,其分子量约为37.13 kDa,等电点PI为5.11。与NCBI网站中已公布的基因进行Blastp比对,发现该序列与鳄梨炭疽菌(C.gloeosporioides)(EQB54542.1)的内切葡聚糖酶基因相似性均为99%;该基因的敲除载体pCgEg1BGH-1构建成功。CgEg1B基因具备真菌内切葡聚糖酶基因家族的序列特征,推测CgEg1B基因可能与芒果炭疽病菌的侵入、定植和致病性有关。
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关 键 词: | 芒果 胶孢炭疽菌 内切葡聚糖酶CgEg1B基因 克隆 敲除载体 |
收稿时间: | 2016/4/9 0:00:00 |
修稿时间: | 2016/4/18 0:00:00 |
Clone and Construction of Disruption Vector of Gene CgEg1B from Colletotrichum gloeosporioides on Mango |
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Abstract: | |
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Keywords: | mango Colletotrichum gloeosporioides endoglucanase gene CgEg1B cloning disruption vector |
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