| 苹果Mal d 1基因的原核表达及纯化 |
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| 引用本文： | 宗泽冉,张彩霞,丛佩华,田义,张利义,韩晓蕾.苹果Mal d 1基因的原核表达及纯化[J].中国果业信息,2017,46(5). |
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| 作者姓名： | 宗泽冉 张彩霞 丛佩华 田义 张利义 韩晓蕾 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院果树研究所,中国农业科学院果树研究所,中国农业科学院果树研究所,中国农业科学院果树研究所,中国农业科学院果树研究所,中国农业科学院果树研究所 |
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| 摘 要： | 以“王林”苹果为试材，采用RT-PCR的方法克隆获得Mal d 1基因，并将该基因连接到原核表达载体pCold Ⅱ上，经测序确定所构建的重组载体pCold-Mal d 1开放阅读框正确。将获得的重组质粒pCold-Mal d 1转化大肠杆菌BL21（DE3）菌株，经0.1 mmol?L-1IPTG，15 癈，24 h冷诱导表达，SDS-PAGE电泳检测，证明Mal d 1蛋白获得了稳定而高效的表达，所表达蛋白是大小约为22.4 kD的融合蛋白。经镍柱纯化后获得相对单一的蛋白，可用于免疫组织化学，蛋白印记检测等。
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| 关 键 词： | 苹果 斑点落叶病 原核表达 纯化 |
| 收稿时间： | 2017/1/19 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2017/3/29 0:00:00 |
Prokaryotic expression and purification of Mald1 gene in apple |
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