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柑橘黄龙病菌LAMP检测制样方法的比较
引用本文:丁鹏,卢占军.柑橘黄龙病菌LAMP检测制样方法的比较[J].中国果业信息,2018,47(1).
作者姓名:丁鹏  卢占军
作者单位:生命与环境科学学院,生命与环境科学学院
基金项目:国家自然科学基金(编号31560602);江西省科技计划重大项目(编号20152ACF60003);江西省杰出青年人才资助计划项目(编号20171BCB23074);江西省2016年度研究生创新专项资金项目(编号YC2016-S408);江西省科技计划重大项目(编号20161ACF60016);江西现代农业科研协同创新专项经费(编号JXXTCX2015002-003);江西省科技计划重大项目(编号20143ACF60012)。
摘    要:分析比较适合大规模柑橘样品黄龙病LAMP检测的制样方法,为柑橘黄龙病的防治提供技术支持。分别采用CTAB-trion法、磁珠法、裂解法、浸提法四种制样方法提取病原菌核酸,利用LAMP和常规PCR进行扩增,并从制备步骤、简易程度、核酸质量、成本、耗时及环保等方面比较,确定最佳制样方法。CTAB-trion法和磁珠法提取的核酸质量最好,其OD260/OD280值在1.8-2.0之间,满足LAMP扩增要求,但操作步骤繁琐、困难,成本、耗时较高且CTAB-trion法需使用苯酚和氯仿试剂;裂解法提取的核酸质量虽不高,但可满足LAMP扩增,同时其操作步骤极少且易,成本低、耗时少,相对环保;浸提法提取的核酸量少、质量差,无法满足LAMP扩增要求。裂解法是柑橘黄龙病LAMP检测的最佳制样方法,与LAMP联用可建立成本小、操作简便、高效快速、环境友好、结果可视化、无需昂贵特殊仪器、适合大规模柑橘样品的黄龙病检测。

关 键 词:柑橘黄龙病  环介导等温扩增  制样方法  核酸
收稿时间:2017/11/27 0:00:00
修稿时间:2017/11/27 0:00:00

Comparative Test for DNA Extraction Methods of Cirtrus Huanglongbing Suitable for LAMP Assay
LU Zhan-jun.Comparative Test for DNA Extraction Methods of Cirtrus Huanglongbing Suitable for LAMP Assay[J].China Fruit News,2018,47(1).
Authors:LU Zhan-jun
Institution:Life and Environmental Sciences College,Gannan Normal University,Jiangxi Ganzhou
Abstract:
Keywords:Cirtrus Huanglongbing    LAMP    extraction methods    DNA
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