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犬冠状病毒V1株纤突蛋白全基因克隆与序列分析
引用本文:乔军,夏咸柱,胡桂学,谢之景,闫芳,杨松涛,黄耕.犬冠状病毒V1株纤突蛋白全基因克隆与序列分析[J].上海交通大学学报(农业科学版),2004,22(3):266-271.
作者姓名:乔军  夏咸柱  胡桂学  谢之景  闫芳  杨松涛  黄耕
作者单位:1. 中国人民解放军军需大学,军事兽医研究所,长春,130062
2. 吉林农业大学,动物科技学院,长春,130118
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30000123)
摘    要:首次对犬冠状病毒(CCV)V1株纤突蛋白(S)基因进行了克隆和测序。根据GenBank中报道的CCV V54株S基因序列,设计了一对特异性引物,对CCV V1野毒株S基因进行了RT-PCR扩增。将扩增得到的PCR产物纯化后克隆到pGEM-T中得到重组质粒pTS,用于序列测定。结果该基因全长4362bp,编码1453个氨基酸,N端前18个氨基酸为推测的信号肽序列,后1435个氨基酸构成成熟蛋白。将V1株S全基因与GenBank中已发表的6个CCV毒株S基因进行了比较,结果核苷酸序列同源性在91.0%~99.0%之间;推导的氨基酸序列同源性在93.0%~99.0%之间;同时发现CCV变异区主要集中在S基因前1/2处,其中350-370、439-478、1718-1818三个区域碱基变异较大,而1060-1700区碱基却十分保守。基于S全基因聚类分析结果表明,S基因分型结果与CCV毒力强弱并不一致;V1野毒株推导的S蛋白潜在的N-联糖基化位点与CCV V54强毒相同,均为34个,比Insavc-1弱毒多一个;其中第566-568位糖基化位点是多数强毒拥有而弱毒Insavc-1没有的。推导的V1株S蛋白疏水性及抗原表位与Insavc-1株有一定的差异,这些差别对病毒致病性和免疫原性等影响需进一步的研究。

关 键 词:  冠状病毒V1株  纤突蛋白基因  基因克隆  序列分析  基因工程疫苗
文章编号:1671-9964(2004)03-0266-06
修稿时间:2003年11月6日

Cloning and Sequence Analysis of Spike Protein Gene of Canine Coronavirus Strain V1
QIAO Jun,XIA Xian-zhu,HU Gui-xue,Xie Zhi-jing,Yan Fang,Yang Song-tao,Huang Gen.Cloning and Sequence Analysis of Spike Protein Gene of Canine Coronavirus Strain V1[J].Journal of Shanghai Jiaotong University (Agricultural Science),2004,22(3):266-271.
Authors:QIAO Jun  XIA Xian-zhu  HU Gui-xue  Xie Zhi-jing  Yan Fang  Yang Song-tao  Huang Gen
Institution:QIAO Jun1,XIA Xian-zhu1,HU Gui-xue2,Xie Zhi-jing1,Yan Fang1,Yang Song-tao1,Huang Gen1
Abstract:
Keywords:canine coronavirus strain V1  spike protein gene  cloning and sequence analysis
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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