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基于RNA-seq结果开发猪SSR标记
引用本文:李文霞,吴怡琦,杨帅,张燕伟,路畅,杨阳,蔡春波,高鹏飞,郭晓红,李步高,曹果清.基于RNA-seq结果开发猪SSR标记[J].畜牧兽医学报,2021,52(6):1535-1549.
作者姓名:李文霞  吴怡琦  杨帅  张燕伟  路畅  杨阳  蔡春波  高鹏飞  郭晓红  李步高  曹果清
作者单位:山西农业大学动物科学学院, 太谷 030801
基金项目:三晋学者支持计划专项经费资助(2016;2017);山西省“1331工程”;山西省农业重点研发项目(201803D221022-1)
摘    要:旨在开发猪SSR标记,为猪遗传多样性分析、亲缘关系鉴定、标记辅助选择等奠定基础。本研究基于前期对6月龄大白猪和马身猪背最长肌RNA-seq结果,根据SSR在染色体上的分布、碱基类型、重复次数等的差异随机筛选154个位点,设计合成SSR引物,进行PCR扩增、PAGE检测及克隆测序验证,开发多态性SSR标记。利用开发的SSR标记对马身猪、大白猪、晋汾白猪及山西黑猪等4个猪种各30头6月龄个体进行遗传多样性分析,以评价所开发SSR标记的应用效果。结果,从36 693条转录组Unigene序列中搜索到10 488个SSRs位点,纯合型SSR为9 424个,复合型SSR为1 064个,分布于6 953条Unigene序列,其中4 727条Unigene含有单个SSR,2 226条Unigene含有2个及以上SSRs,SSR发生频率为18.95%,出现频率为28.58%。优势SSR重复类型为单、三、二核苷酸重复,其重复次数主要集中于5~22次;优势重复基序序列类型为A/T、AC/GT、GCC/GGC,长度类型为10~20 bp。随机筛选154个位点进行验证,共有124对引物扩增出清晰、特异的条带,扩增效率为80.52%,其中25对SSR引物具有多态性,占比为16.23%。利用25对SSR引物对4个猪种共120个个体进行遗传多样性分析,共识别到131个等位基因,等位基因数为2~7个,平均等位基因数为5.24,平均有效等位基因数为3.487 1,平均PIC为0.646 7,呈高度多态,总体表现出较高的多样性。本研究结果表明,基于猪转录组测序结果开发SSR标记是可行的,结果丰富了猪可用SSR标记数据库,且开发的SSR标记准确可靠,多态性高,可用于猪的遗传多样性分析。

关 键 词:RNA-seq  SSR    遗传多样性  
收稿时间:2020-10-29

Development of SSR Markers Based on RNA-seq Result of Pig
LI Wenxia,WU Yiqi,YANG Shuai,ZHANG Yanwei,LU Chang,YANG Yang,CAI Chunbo,GAO Pengfei,GUO Xiaohong,LI Bugao,CAO Guoqing.Development of SSR Markers Based on RNA-seq Result of Pig[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2021,52(6):1535-1549.
Authors:LI Wenxia  WU Yiqi  YANG Shuai  ZHANG Yanwei  LU Chang  YANG Yang  CAI Chunbo  GAO Pengfei  GUO Xiaohong  LI Bugao  CAO Guoqing
Institution:College of Animal Science, Shanxi Agricultural University, Taigu 030801, China
Abstract:
Keywords:RNA-seq  SSR  pig  genetic diversity  
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