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甘蔗蔗糖合酶基因Susy半定量表达体系的建立及其应用
引用本文:黄文静,檀小辉,黄静丽,何龙飞,杨丽涛,李杨瑞,王爱勤.甘蔗蔗糖合酶基因Susy半定量表达体系的建立及其应用[J].热带作物学报,2013,34(7):1288-1293.
作者姓名:黄文静  檀小辉  黄静丽  何龙飞  杨丽涛  李杨瑞  王爱勤
作者单位:中国农业科学院柑桔研究所西南大学柑桔研究所;中国农业科学院柑桔研究所西南大学柑桔研究所;中国农业科学院柑桔研究所西南大学柑桔研究所;中国农业科学院柑桔研究所西南大学柑桔研究所;中国农业科学院柑桔研究所西南大学柑桔研究所;中国农业科学院柑桔研究所西南大学柑桔研究所;中国农业科学院柑桔研究所西南大学柑桔研究所
基金项目:重庆市自然科学基金项目(No. CSTC,2010BB1153);现代农业技术体系资助项目(No. CARS-27)。
摘    要:早期、无损伤、易于操作的阳性芽检测技术,对提高柑橘遗传转化效率是十分有利的。本文设计和构建了nptⅡ::mgfp5融合基因,通过锦橙上胚轴转化体系研究其在柑橘遗传转化中的作用。nptⅡ::mgfp5融合基因全长1 578 bp,编码525个氨基酸,作为表达载体p1301NG的选择标记和报告基因。通过农杆菌介导法转化锦橙上胚轴,再生培养1周后用体式荧光显微镜观察外植体的再生情况。在再生培养第9天时即观察到GFP荧光再生芽的形成,再生培养后10~15 d是GFP再生芽形成的高峰期。GUS染色和PCR分子检测结果证明,GFP荧光检测结果是真实可靠的。研究结果表明:nptⅡ::mgfp5融合基因能够在再生培养早期筛选到阳性转化芽,有助于提高阳性转化芽的存活率,提高柑橘遗传转化效率。

关 键 词:nptⅡ::mgfp5融合基因  柑橘遗传转化  GFP荧光  转化效率

Establishment of Semi-quantitative RT-PCR System for Susy Gene in Sugarcane and Its Application
HUANG Wenjing,TAN XiaoHui,HUANG Jingli,HE Longfei,YANG Litao,LI Yangrui and WANG Aiqin.Establishment of Semi-quantitative RT-PCR System for Susy Gene in Sugarcane and Its Application[J].Chinese Journal of Tropical Crops,2013,34(7):1288-1293.
Authors:HUANG Wenjing  TAN XiaoHui  HUANG Jingli  HE Longfei  YANG Litao  LI Yangrui and WANG Aiqin
Institution:Citrus Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences / Southwest University,;Citrus Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences / Southwest University,;Citrus Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences / Southwest University,;Citrus Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences / Southwest University,;Citrus Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences / Southwest University,;Citrus Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences / Southwest University,;Citrus Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences / Southwest University,
Abstract:
Keywords:Sugarcene(Saccharum officinarum L  )  Sucrose synthase  Drought  Gene expression
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