| 红鳍东方鲀去乙酰化酶SIRT3基因的克隆及原核表达 |
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| 引用本文： | 张伟,姬明丽,张军华,千智斌.红鳍东方鲀去乙酰化酶SIRT3基因的克隆及原核表达[J].湖南农业大学学报(自然科学版),2016,42(4):424-428. |
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| 作者姓名： | 张伟 姬明丽 张军华 千智斌 |
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| 作者单位： | 新乡医学院基础医学院,河南 新乡,453003 |
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| 基金项目： | 河南省教育厅重点项目(14A310027)；新乡医学院高学历人才启动基金(505001) |
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| 摘 要： | 从红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)肝脏组织中提取总RNA,通过RT–PCR扩增,获得SIRT3基因的编码阅读框(ORF),用原核表达载体p ET32a(+)构建p ET32a/SIRT3重组质粒,用异丙基–β–D–硫代半乳糖苷(IPTG)将重组质粒p ET32a/STRT3在大肠杆菌Rosetta(DE3)进行诱导表达,并用镍柱纯化融合表达蛋白。结果显示,红鳍东方鲀SIRT3基因(tr SIRT3)ORF区大小为1 263 bp大小,编码420个氨基酸。经IPTG诱导表达后,获得1个带组氨酸(His)标签的融合蛋白,目的蛋白主要存在于上清溶液中,为可溶性表达。用镍离子亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,获得了相对分子质量约66 000的重组蛋白。
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| 关 键 词： | 红鳍东方鲀 去乙酰化酶 SIRT3 基因 基因克隆 原核表达 |
Cloning and prokaryotic expression of silencing deacetylase SIRT3 gene from Takifugu rubripes |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Takifugu rubripes silencing deacetylase SIRT3 gene gene cloning prokaryotic expression |
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