| 猪MSTN基因敲除载体的构建及细胞筛选 |
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| 引用本文： | 高飞,唐成程,全龙泉,戴祯,苏佰通,赖良学,逄大欣,欧阳红生.猪MSTN基因敲除载体的构建及细胞筛选[J].中国兽医学报,2013,33(1):142-145,160. |
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| 作者姓名： | 高飞 唐成程 全龙泉 戴祯 苏佰通 赖良学 逄大欣 欧阳红生 |
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| 作者单位： | 吉林大学畜牧兽医学院,吉林长春,130062 |
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| 基金项目： | 转基因生物新品种培育重大专项(2011ZX08006-003) |
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| 摘 要： | 构建猪肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)基因的打靶载体并获得敲除MSTN基因的猪胎儿成纤维细胞.以Puro为正筛选基因,白喉毒素-A(DT-A)为负筛选基因.将同源长臂和同源短臂分别插入Puro基因的两侧.同源长短臂分别为4 294 bp和1 015 bp,定点敲除MSTN基因的部分内含子2和部分外显子3.采用FugeneHD 转染法将打靶载体转入37 d的猪胎儿成纤维细胞中,转染后的细胞采用嘌呤霉素筛选.结果显示,成功构建了对猪MSTN基因部分区域进行敲除的打靶载体,共得到48个具有药物抗性的细胞克隆,经PCR检测,获得2个正确同源重组的细胞克隆.
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| 关 键 词： | 猪 MSTN基因 基因敲除 打靶载体 |
Construction of MSTN knock-out porcine vector and MSTN knock-out porcine fetal fibroblast |
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| Institution: | GAO Fei,TANG Cheng-cheng,QUAN Long-quan,DAI Zhen,SU Bai-tong,LAI Liang-xue,PANG Da-xin,OUYANG Hong-sheng*(1.College of Animal Science and Veterinary Medicine,Jilin University,Changchun 130062,China) |
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