大肠埃希菌O157∶H7 eae A基因的克隆及其表达质粒的构建 |
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引用本文: | 龚霞,郭霄峰.大肠埃希菌O157∶H7 eae A基因的克隆及其表达质粒的构建[J].动物医学进展,2006(9). |
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作者姓名: | 龚霞 郭霄峰 |
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作者单位: | 韶关学院英东生物工程学院 广东韶关512005(龚霞),华南农业大学兽医学院 广东广州510640(郭霄峰) |
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基金项目: | 广东省农业攻关项目(2002B21406) |
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摘 要: | 采用自行设计的引物,应用PCR方法直接从广东分离株大肠埃希菌O157∶H7021210的染色体DNA中扩增出eaeA基因的完整阅读框,得到了一条大小约为2 800 bp的基因片段。T-A克隆后将其亚克隆至原核表达载体pET-28a( ),经PCR鉴定、酶切鉴定及核苷酸序列测定,证实成功构建原核重组表达质粒pET-eaeA。大肠埃希菌O157∶H7 eaeA基因的克隆及原核表达质粒的成功构建,为下一步进行诱导表达、活性鉴定及eaeA基因表达蛋白诊断抗原的研制奠定了基础。
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关 键 词: | 大肠埃希菌O157∶H7 eaeA基因 基因克隆 表达质粒 |
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