| 基因探针和PCR对鲤吉陶单极虫的检测 |
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| 引用本文： | 陶增思,张西臣.基因探针和PCR对鲤吉陶单极虫的检测[J].中国兽医学报,1996,16(6):580-584. |
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| 作者姓名： | 陶增思 张西臣 |
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| 作者单位： | 解放军农牧大学畜牧水产系 |
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| 摘 要： | 采用液氮冷冻研磨法破碎吉陶单极虫（Ｔｈｅｌｏｈａｎｅｌｕｓｋｉｔａｕｅｉ）孢子，按常规法提取其基因组ＤＮＡ。取ＤＮＡＥｃｏＲＩ消化产物，采用低熔点琼脂糖回收法制备大（３．０～１５．０ｋｂ）、小（０．５～３．０ｋｂ）片段，将其克隆于ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔｋｓＥｃｏＲＩ位点，经α－互补现象、酶切鉴定和虫体ＤＮＡ生物素标记探针筛选，构建了含２３个克隆的基因文库，克隆片段介于０．９～６．８ｋｂ之间；经阳性克隆标记筛选及特性分析，制备了长度为０．９ｋｂ（１９号质粒克隆片段）的探针，该探针具有较强的敏感性和特异性。对该探针两端ＤＮＡ序列进行分析，设计出１对引物。上游引物序列为：５′ＴＴＴＣＧＡＡＣＣＣＧＣＡＣＡＡＣＡＡＧ３′，下游引物序列为：５′ＴＧＡＧＴＧＧＡＴＡＧ－ＴＡＴＣＧＣＴＧＣ３′。应用该对引物对虫体进行了检测
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| 关 键 词： | 鲤 吉陶单极虫 基因文库构建 基因探针 PCR |
Detection of Thelohanellus kitauei by Using Gene Probe and PCR Method |
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| Tao Zengsi,Li Chengyao,Lu Qiang,Wang Zhenying,Zhang Xichen,Wang Jianguo,Li Dechang.Detection of Thelohanellus kitauei by Using Gene Probe and PCR Method[J].Chinese Journal of Veterinary Science,1996,16(6):580-584. |
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| Authors: | Tao Zengsi Li Chengyao Lu Qiang Wang Zhenying Zhang Xichen Wang Jianguo Li Dechang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Thelohanellus kitauei gene library gene probe PCR |
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