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鲤科疱疹病毒2型TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立
引用本文:徐晔,段宏安,周毅,丁超.鲤科疱疹病毒2型TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立[J].中国预防兽医学报,2014,36(12).
作者姓名:徐晔  段宏安  周毅  丁超
作者单位:连云港出入境检验检疫局,江苏连云港,222042
摘    要:为建立快速和敏感的检测鲤科疱疹病毒2型(CyHV-2)的方法,本研究根据CyHV-2 DNA聚合酶基因序列合成引物和TaqMan探针,建立了CyHV-2荧光定量PCR检测方法.结果显示,以重组质粒为标准品建立的标准曲线在5拷贝/μL~5×108拷贝/μL具有良好的线性关系,相关系数为0.999;其最低检出量为5拷贝/μL,比普通PCR的敏感度高100倍.该方法仅对CyHV-2的靶基因序列进行扩增,而对锦鲤疱疹病毒、流行性造血器官坏死病病毒、病毒性出血性败血症病毒、传染性胰脏坏死病病毒及鲤春病毒血症病毒核酸扩增结果均为阴性.组内和组间重复试验变异系数的平均值分别为0.5%和0.3%,具有良好的重复性.与常规PCR相比较,该方法具有快速、敏感、特异及高通量检测等优点,适用于对CyHV-2的快速检测.

关 键 词:鲤科疱疹病毒2型  荧光定量PCR  检测

Establishment of real-time PCR assay for detection of Cyprinid herpesvirus 2
XU Ye,DUAN Hong-an,ZHOU Yi,DING Chao.Establishment of real-time PCR assay for detection of Cyprinid herpesvirus 2[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2014,36(12).
Authors:XU Ye  DUAN Hong-an  ZHOU Yi  DING Chao
Abstract:
Keywords:Cyprinid herpesvirus 2  real-time PCR  detection
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