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| 禽源性大肠杆菌HPI毒力岛irp2基因PCR检测方法的建立与应用 | |
| 作者单位： | ;1.山东省滨州畜牧兽医研究院;2.山东省滨州畜禽蜂胶疫苗研究开发推广中心;3.山东绿都安特动物药业有限公司 |
| 摘 要： | 为了解临床禽源致病性大肠杆菌中高致病性毒力岛(High pathogenicity island HPI)流行情况和基因特征,根据Gen Bank已知禽源irp2基因序列,设计、合成一对特异性引物,建立irp2基因PCR检测方法,优化、确定PCR扩增特性,进行敏感性、特异性、重复性检测评价。对256份临床分离禽源大肠杆菌进行irp2基因PCR检测和基因遗传变异分析。结果显示,建立的PCR检测方法敏感性可达2.14×10~(-4)ng/μL;特异性显示与鸡沙门菌、副鸡嗜血杆菌、鸭疫里默菌、禽巴氏杆菌、鸡毒支原体、鸡新城疫病毒、禽流感病毒(H9N5)核酸均无交叉反应;重复性显示3份阳性样品重复5次检测,变异系数3.4%~5.0%。256份临床样品PCR检测irp2基因,阳性率30.6%。获得了9株分离株irp2基因序列,分析显示,与GenBank已知基因同源性高达96.2%以上。说明建立的禽源大肠杆菌HPI毒力岛irp2基因PCR检测方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可应用于临床致病性大肠杆菌毒力岛基因快速检测。 |
| 关 键 词： | 禽源大肠杆菌 HPI 毒力岛 irp2基因 |
Establishment and application of PCR detection method for HPI irp2 gene of avian Escherichia coli |
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