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| 猪星状病毒1型衣壳蛋白的截短表达及多克隆抗体的制备 | |
| 摘 要： | 为制备猪星状病毒1型(PAstV1)Cap蛋白高变区特异性多克隆抗体,本研究根据PAstV-GX1株Cap蛋白Cs(aa420～aa669)基因序列设计引物,PCR扩增该片段(Cs)后克隆于pET-32a(+)原核表达载体,构建重组表达质粒pET32a-Cs,将其转化E. coli BL21感受态细胞,经终浓度1 mmol/L的IPTG在37℃诱导6 h后经SDS-PAGE检测表达产物,结果显示在大约47 ku处出现目的蛋白,且该蛋白以可溶性形式表达。将重组Cs蛋白经Ni柱纯化后乳化,按100μg/只免疫6周龄BALB/c小鼠,三免后5 d采血分离血清,经western blot和间接免疫荧光检测结果显示,获得的Cap蛋白高变区多克隆抗体可特异性识别PAstV-GX1感染的PK15细胞表达的病毒蛋白。本研究首次制备的PAstV Cap蛋白高变区纯化蛋白及其多克隆抗体为后续PAstV病原学研究奠定了基础。 |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ | |