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芸薹属TT19基因家族RNA干扰载体的构建
引用本文:陈艳,柴友荣,张迪,冯瑜.芸薹属TT19基因家族RNA干扰载体的构建[J].贵州农业科学,2011,39(3).
作者姓名:陈艳  柴友荣  张迪  冯瑜
作者单位:西南大学,农学与生物科技学院,重庆,400716;农业部生物技术与作物品质改良重点实验室,重庆,400716;重庆市作物品质改良重点实验室,重庆,400716;重庆市油菜工程技术研究中心,重庆,400716
基金项目:国家自然科学基金项目"甘蓝型油菜原花青素途径种皮特异表达基因的克隆和表达抑制",国家"863"计划课题"甘蓝型油菜类黄酮途径功能基因克隆及黄籽性状代谢工程研究","油菜品质和杂种优势利用相关基因的克隆与功能分析",重庆市科技攻关项目"油菜分子育种及品质检测技术研究"
摘    要:为构建芸薹属TT19基因家族的RNAi载体,为芸薹属植物的种皮色素、观赏色彩等性状的研究和修饰打基础.利用PCR克隆芸薹属TT19基因家族的RNAi片段,采用双酶切将其反义片段和正义片段分别从T-载体亚克隆到平台载体pFGC5941M的启动子与间隔区之间和间隔区与终止子之间,形成RNAi载体,转化大肠杆菌并完成PCR鉴定,再转化根癌农杆菌LBA4404得到工程菌株.结果表明:克隆得到200 bp(含人工酶切位点)的芸薹属TT19基因家族RNAi片段BTT19I,其对应于甘蓝型油菜BnTT19-1 mRNA的363~540 bp,其反义和正义片段分别被NcoI+AatII和BamHI+XbaI双酶切亚克隆到pFGC5941M中,得到10552 bp的RNAi载体pFGC5941M-BTT19I(简称pBTT19I).成功构建了芸薹属TT19基因家族的RNAi载体.

关 键 词:芸薹属  RNA干扰(RNAi)  载体构建

Construction of RNA Interference Vector of TT19 Gene Family in Brassica
CHEN Yan,CHAI You-rong,ZHANG Di,FENG Yu.Construction of RNA Interference Vector of TT19 Gene Family in Brassica[J].Guizhou Agricultural Sciences,2011,39(3).
Authors:CHEN Yan  CHAI You-rong  ZHANG Di  FENG Yu
Abstract:
Keywords:TT19
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