| 陆地棉GhCRE1影响种子萌发初探 |
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| 引用本文： | 徐敏慧,Josee Ornella Musaniwabo,韩少凡,刘一涵,杜丽桦,刘爱玉,汪启明,屠小菊.陆地棉GhCRE1影响种子萌发初探[J].华北农学报,2022(3):19-26. |
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| 作者姓名： | 徐敏慧 Josee Ornella Musaniwabo 韩少凡 刘一涵 杜丽桦 刘爱玉 汪启明 屠小菊 |
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| 作者单位： | 1. 湖南农业大学生物科学技术学院;2. 湖南农业大学农学院 |
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| 基金项目： | 湖南省重点研发计划项目(2020NK2023)；;湖南省自然科学基金项目(2018JJ3233)； |
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| 摘 要： | 为明确陆地棉细胞分裂素受体基因(GhCRE1)在调控植物生长发育中的功能，为研究陆地棉GhCRE1基因调控种子萌发的分子机理提供材料，进一步从分子水平上提高种子萌发率，通过克隆陆地棉GhCRE1基因，利用基因过表达技术将该克隆片段连接至含Ubiquitin启动子的pCUbi1390载体上构建该基因的过表达载体，同时利用CRISPR/Cas9基因编辑技术设计拟南芥CRE1基因的sgRNA片段，合成sgRNA核苷酸序列，从而构建拟南芥CRE1基因靶向敲除载体。将以上2种载体转化农杆菌，使用花序浸染法，以拟南芥为受体材料创建GhCRE1过表达株系及基因编辑功能缺失突变体。接着利用PCR技术和qPCR技术筛选鉴定获得过量表达的GhCRE1拟南芥株系及CRE1功能缺失的拟南芥株系并收获种子，经过对比统计收获的种子与野生型种子在1/2MS培养基上的萌发势进行表型分析，进一步明确陆地棉GhCRE1基因影响种子萌发的功能。结果显示，本研究成功获得了拟南芥GhCRE1过表达株系及CRISPR基因编辑功能缺失突变体株系，且通过数据整理后发现，在种子萌发第2天时，相比野生型，2个过表达转基因株系萌发势分别提...
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| 关 键 词： | 陆地棉 GhCRE1基因 过表达 CRISPR/Cas9技术 种子萌发 |
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