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利用PCR技术特异性检测人参恶疫霉菌等6种疫霉菌
引用本文:李萌,卢宝慧,高洁,张艳敬.利用PCR技术特异性检测人参恶疫霉菌等6种疫霉菌[J].吉林农业大学学报,2022(2):135-142.
作者姓名:李萌  卢宝慧  高洁  张艳敬
作者单位:吉林农业大学植物保护学院
基金项目:国家重点研发计划项目(2018YFD0201100);;吉林省科技发展计划项目(20180311001YY);
摘    要:为了建立能同时检测人参恶疫霉菌(Phytophthora cactorum)等6种疫霉菌的快速检测方法,以期为病害的发生预测和早期诊断技术提供依据。通过比较基因组学分析,根据恶疫霉菌等疫霉菌属的6个种共有基因设计引物,通过PCR方法筛选特异性引物,并对引物的特异性、灵敏度和应用可行性进行验证。结果表明:筛选到了1对用于检测疫霉属6种病菌的常规PCR特异性引物YB-00394F/YB-00394R,采用优化的PCR扩增体系和反应条件进行扩增,筛选到的特异引物分别从疫霉属的6个种中扩增出386 bp大小的条带,而其他非疫霉属真菌无扩增条带。常规PCR法对人参恶疫霉菌基因组DNA检测的灵敏度为100 fg/μL,应用PCR方法成功快速的在62份植物样本和95份土壤样本中检测到了目标疫霉病菌。建立的常规PCR方法可以快速灵敏地检测6种疫霉属的真菌。

关 键 词:人参  疫霉菌  特异性检测  PCR技术
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