| 绵羊miR-127/FOXO4反馈环路及其对卵泡颗粒细胞凋亡相关基因表达的影响 |
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| 引用本文： | 付强,岳巧娴,锡建中,宋鹏琰,陈晓勇,周荣艳.绵羊miR-127/FOXO4反馈环路及其对卵泡颗粒细胞凋亡相关基因表达的影响[J].畜牧兽医学报,2022,53(1):66-75. |
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| 作者姓名： | 付强 岳巧娴 锡建中 宋鹏琰 陈晓勇 周荣艳 |
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| 作者单位： | 河北农业大学动物科技学院, 保定 071001 |
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| 基金项目： | 河北省自然科学基金(C2019204039);河北农业大学精准畜牧学科群建设项目(1090064)。 |
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| 摘 要： | 旨在研究oar-miR-127/FOXO4反馈环路及其对绵羊卵泡颗粒细胞的作用。本研究利用Promoter 2.0预测绵羊miR-127启动子，利用JASPAR数据库预测转录因子FOXO4与oar-miR-127启动子区的结合位点，构建包含预测结合位点的pGL3-basic-miR-127荧光素酶报告载体和pcDNA-FOXO4过表达载体；利用TargetScan软件在线预测oar-miR-127与FOXO4基因3'-UTR区结合位点，构建包含预测结合位点的pmir-GLO-FOXO4野生型、突变型和缺失型荧光素酶报告基因重组质粒；将pGL3-basic-miR-127荧光素酶报告载体和pcDNA-FOXO4过表达载体共（或单独）转染体外培养的绵羊卵泡颗粒细胞，FOXO4突变型、野生型和缺失型重组质粒与miR-127 mimic/mimic NC共转染体外培养的293T细胞，48 h后检测荧光素酶活性；pcDNA-FOXO4过表达载体（miR-127 mimic/mimic NC）转染绵羊卵泡颗粒细胞48 h，利用qRT-PCR检测miR-127（FOXO4）及凋亡基因（Casp3、Bax及BCL2）的表达水平。过表达转录因子FOXO4显著降低了oar-miR-127启动子相对荧光素酶活性（P<0.05）和oar-miR-127表达水平（P<0.05）；miR-127 mimic和FOXO4野生型重组质粒共转染的颗粒细胞荧光素酶活性显著低于共转染miR-127 mimic和FOXO4缺失/突变型重组质粒的细胞（P<0.05）。转染miR-127 mimic的颗粒细胞中FOXO4表达量显著降低（P<0.05），Casp3和Bax基因表达水平极显著升高（P<0.001）；过表达转录因子FOXO4的颗粒细胞中Casp3和Bax的表达水平无显著变化（P>0.05），但BCL2相对表达量显著降低（P<0.05）。本研究证实了oar-miR-127与靶基因FOXO4间存在反馈环路，并促进绵羊卵泡颗粒细胞的凋亡，为研究其在绵羊卵泡发育中的作用机制奠定了基础。
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| 关 键 词： | miR-127 FOXO4 绵羊颗粒细胞 细胞凋亡 |
| 收稿时间： | 2021-05-18 |
Effect of Oar-miR-127/FOXO4 Feedback Loop on Genes Associated with Apoptosis of Sheep Granulosa Cells |
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| FU Qiang,YUE Qiaoxian,XI Jianzhong,SONG Pengyan,CHEN Xiaoyong,ZHOU Rongyan.Effect of Oar-miR-127/FOXO4 Feedback Loop on Genes Associated with Apoptosis of Sheep Granulosa Cells[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2022,53(1):66-75. |
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| Authors: | FU Qiang YUE Qiaoxian XI Jianzhong SONG Pengyan CHEN Xiaoyong ZHOU Rongyan |
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| Institution: | College of Animal Science and Technology, Hebei Agricultural University, Baoding 071001, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | miR-127 FOXO4 sheep granulosa cells apoptosis |
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