| 转录靶向猪瘟病毒3′-UTR shRNA细胞株干扰猪瘟病毒增殖的检测 |
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| 引用本文： | 郭抗抗,徐浩,张彦明,张为民,冶贵生,熊奎州,谢林红,党如意.转录靶向猪瘟病毒3′-UTR shRNA细胞株干扰猪瘟病毒增殖的检测[J].畜牧兽医学报,2008,39(6). |
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| 作者姓名： | 郭抗抗 徐浩 张彦明 张为民 冶贵生 熊奎州 谢林红 党如意 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学动物医学院,杨凌,712100 |
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| 摘 要： | 对筛选的转录猪瘟病毒石门株3-′UTR shRNA的PK-15细胞株P-1（114-132位）、P-2（136-154位）和P-3（209-227位）分别接种猪瘟病毒（CSFV）,在接毒后第72和96小时用半定量反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测CSFVNS3基因及-βactin基因,以研究构建细胞株在转录水平上对CSFV增殖干扰的效果;接毒后第72、96和148小时以酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测细胞NS3蛋白表达量,通过OD490值分析构建细胞株在病毒蛋白表达水平上对CSFV增殖的影响。检测结果表明：（1）接毒后第72和96小时P-1、P-2和P-3细胞株中NS3基因的量明显减少,与接毒的空白PK-15细胞比较差异显著（P〈0.05）,说明P-1、P-2和P-3细胞株转录的shRNA能干扰CSFV RNA的转录;（2）接毒后第72和96小时P-1、P-2、P-3细胞株中NS3蛋白的表达量明显少于接毒的PK-15细胞（P〈0.05）,说明转录的shRNA在病毒蛋白水平上能干扰CSFVNS3基因的表达,但接毒后第148小时干扰效果有所降低。
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| 关 键 词： | 半定量RT-PCR ELISA 猪瘟病毒 3′-UTR |
Detection of the Interference to the Reproduction of CSFV by PK-15 Cell Strains Transcribing shRNA Targeted to the 3'-UTR |
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| GUO Kang-kang,XU Hao,ZHANG Yan-ming,ZHANG Wei-min,YE Gui-sheng,XIONG Kui-zhou,XIE Lin-hong,DANG Ru-yi.Detection of the Interference to the Reproduction of CSFV by PK-15 Cell Strains Transcribing shRNA Targeted to the 3'-UTR[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2008,39(6). |
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| Authors: | GUO Kang-kang XU Hao ZHANG Yan-ming ZHANG Wei-min YE Gui-sheng XIONG Kui-zhou XIE Lin-hong DANG Ru-yi |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | ELISA |
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