密码子优化的隔孢伏革菌植酸酶基因在毕赤酵母中高效表达 |
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引用本文: | 陆益新,王瑞鲲,田永杰,吴倩倩,李湘鸣.密码子优化的隔孢伏革菌植酸酶基因在毕赤酵母中高效表达[J].国外畜牧学(饲料),2015(12). |
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作者姓名: | 陆益新 王瑞鲲 田永杰 吴倩倩 李湘鸣 |
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作者单位: | 扬州大学医学院 |
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摘 要: | 本研究目标是建立隔孢伏革菌植酸酶(6-phyA)分泌表达量高的毕赤酵母株,其作为饲料添加剂,可促进单胃类动物消化道对饲料磷的吸收,减少家畜粪便中磷对环境的污染,又可满足饲料加工的需要.按照毕赤酵母对遗传密码子的偏好性,利用重叠PCR方法人工合成6-phyA,将其插入到pPIC9K载体,构建成6-phyA整合型毕赤酵母表达载体,通过电转化转入GS115酵母细胞,并筛选出Mut+高拷贝转化子.通过SDS-PAGE分析,发现在该酵母细胞克隆株的发酵液中,见有一明显6-phyA条带,经测表达产物酶活性,发现均为对照酵母株的7.5倍以上,说明6-phyA在所构建的毕赤酵母株中成功、有效的表达.
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关 键 词: | 隔孢伏革菌植酸酶 毕赤酵母 密码子偏好 |
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