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海豚链球菌重组C5a肽酶对斑点叉尾(鱼回)的免疫保护性研究
引用本文:郑宗林,汪开毓,肖孟玮,王均,李岚敏,贺扬,陈德芳,黄凌远.海豚链球菌重组C5a肽酶对斑点叉尾(鱼回)的免疫保护性研究[J].上海水产大学学报,2015,24(3).
作者姓名:郑宗林  汪开毓  肖孟玮  王均  李岚敏  贺扬  陈德芳  黄凌远
作者单位:1. 四川农业大学鱼病研究中心,四川雅安625014;西南大学荣昌校区水产系,重庆402460
2. 四川农业大学鱼病研究中心,四川雅安625014;四川农业大学动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川雅安625014
摘    要:采用饱和硫酸铵法对斑点叉尾(鱼回)IgM进行粗提,用亲硫树脂对IgM进行纯化,将纯化的IgM免疫家兔,并用ELISA检测兔抗斑点叉尾(鱼回)IgM抗体效价;制备重组C5a肽酶(pSCPI),分别用1、2和3μg/g的抗原免疫斑点叉尾(鱼回),以PBS作为对照;测定了第21、28、35、42和49天斑点叉尾(鱼回)产生的特异性抗体的水平,并于免疫后第4周用海豚链球菌DGX07株进行攻毒.结果显示:通过亲硫树脂亲和层析后得到了较纯的IgM重链和轻链,分别约70 ku和27 ku,浓度达到6.4 mg/mL,免疫家兔后的兔抗斑点叉尾(鱼回)IgM抗体效价达1∶51200;重组蛋白pSCPI免疫斑点叉尾(鱼回)后第3周抗体水平开始增加,第4周达到峰值,第5周后开始下降,且3 μg/g浓度组第4周抗体水平最高,但与2 μg/g浓度组第4周抗体水平差异不显著;攻毒实验显示,3个组14 d平均累计死亡率分别为47.5%、45%和47.5%,平均相对保护率分别为40.63%、43.75%和40.63%,且死亡鱼体内分离到唯一海豚链球菌.以上结果表明重组pSCPI蛋白具有较好的免疫保护作用,能够作为海豚链球菌亚单位疫苗的候选之一.

关 键 词:海豚链球菌  斑点叉尾(鱼回)  IgM  免疫保护率

The immunoprotectivity study of the pSCPI of Streptococcus iniae against channel catfish,Ictalurus punctatus
Abstract:
Keywords:Streptococcus iniae  Ictalurus punctatus  IgM  immunoprotectivity
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