| 栉江珧和近江牡蛎的精子超低温冷冻保存 |
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| 引用本文： | 于非非,余祥勇,郑娇,曹静,王梅芳.栉江珧和近江牡蛎的精子超低温冷冻保存[J].农业生物技术学报,2016(2):305-312. |
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| 作者姓名： | 于非非 余祥勇 郑娇 曹静 王梅芳 |
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| 作者单位： | 广东海洋大学水产学院,湛江,524088 |
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| 基金项目： | 广东海洋大学优秀青年骨干教师培训项目(No.2014004)和广东省海洋渔业科技推广专项项目(No.A201308A11) |
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| 摘 要： | 栉江珧(Atrina pectinata)和近江牡蛎(Crassostrea rivularis)是我国重要的海产经济贝类,建立其精子冷冻保存技术及精子冷冻库,对种质资源的保护和遗传育种具有重要意义.本研究对其精子冷冻保存过程中冷冻剂种类和浓度的选择、冷冻程序、平衡时间、保存体积、精液稀释方式、保存时间等多个影响因素进行了比较筛选,并利用显微镜直接检测和曙红Y(eosin Y)染色检测结合的方式检验精子存活率.结果表明,二甲亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)作为抗冻剂的保存效果要明显优于甘油(glycerol,Gly),终浓度为8％～10％的二甲亚砜保存效果最好,其栉江珧和近江牡蛎精子活率均可达60％以上,而甘油保护下精子活率小于40％.精液的稀释方式采用将抗冻液等分为3份,依次与精液混合,每次间隔8 min,整个过程约30 min;此种精液稀释方式与一次性混合方式相比,精子活率可提高约30％.稀释后精液需要在4℃下平衡15～25 min,平衡样品与直接冷冻样品相比,精子活率提高约50％.精液降温程序为在样品投入液氮前,于液氮面以上15 cm处停留5 min,5 cm处停留10 min,精子活率可达60％以上;而未经此降温程序直接投入液氮中的样品精子活率接近0.与此降温程序相对应的样品冷冻体积在1.0～1.4 mL范围内为宜.冷冻180 d内复苏的精子活率由90％左右(鲜精)下降至60％左右,180 d后精子活率下降至56％左右.研究结果为栉江珧和近江牡蛎精子超低温冷冻保存、双壳类种质保护和遗传育种提供了理论和技术依据.
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| 关 键 词： | 栉江珧 近江牡蛎 精子 冷冻保存 |
Cryopreservation of Spermatozoa in Pen Shell (Atrina pectinata) and Suminoe Oyster (Crassostrea rivularis) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Atrina pectinata Crassostrea rivularis Sperm Cryopreservation |
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