| 橡胶草及其近缘种ISSR反应体系及扩增程序的优化 |
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| 引用本文： | 徐显异,陆婷,田嘉,陈小和,陈艾.橡胶草及其近缘种ISSR反应体系及扩增程序的优化[J].分子植物育种,2019,17(12):4007-4015. |
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| 作者姓名： | 徐显异 陆婷 田嘉 陈小和 陈艾 |
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| 作者单位： | 新疆农业大学林学与园艺学院,乌鲁木齐,830052;新疆农业大学林学与园艺学院,乌鲁木齐,830052;新疆农业大学林学与园艺学院,乌鲁木齐,830052;新疆农业大学林学与园艺学院,乌鲁木齐,830052;新疆农业大学林学与园艺学院,乌鲁木齐,830052 |
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| 摘 要： | 本研究旨在建立和优化橡胶草及其近缘种ISSR (Inter-simple sequence repeat)反应体系和扩增程序。以橡胶草及其近缘种叶片为供试材料,采用单因素试验方法,正交试验方法 L16(44)和极差分析方法,对橡胶草ISSR-PCR反应中4个主要影响因素(dNTP浓度, DNA浓度,引物浓度和Taq DNA聚合酶浓度)进行优化,并在最优反应体系的基础上进行引物和退火温度的筛选。结果表明:dNTP和DNA对PCR扩增结果有较为显著的影响,引物和Taq酶的浓度变化对扩增结果无显著影响。最后确定橡胶草及其近缘种ISSR-PCR反应体系(20.0μL)为:双蒸水14.2μL,10×Buffer (含Mg2+) 2.0μL,DNA模板50.0 ng,10 mmol/L引物1.2μL,2.5 mmol/L dNTP 1.6μL,5 U Taq DNA聚合酶0.1μL。PCR扩增程序为:94℃5 min,94℃45 s,退火1 min,72℃70 s,45个循环,72℃10 min,4℃保存。本研究为橡胶草及其近缘种的遗传多样性和交配系统等后续研究提供理论参考。
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| 关 键 词： | 橡胶草(Taraxacum kok-saghyz) ISSR 单因素试验 正交试验 |
Optimization of ISSR Reaction System and Amplification Procedure for Taraxacum kok-saghyz and Its Related Species |
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| Xu Xianyi,Lu Ting,Tian Jia,Chen Xiaohe,Chen Ai.Optimization of ISSR Reaction System and Amplification Procedure for Taraxacum kok-saghyz and Its Related Species[J].Molecular Plant Breeding,2019,17(12):4007-4015. |
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| Authors: | Xu Xianyi Lu Ting Tian Jia Chen Xiaohe Chen Ai |
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| Institution: | (College of Forestry and Horticulture, Xinjiang Agricultural University, Urumqi, 830052) |
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| Abstract: | Xu Xianyi;Lu Ting;Tian Jia;Chen Xiaohe;Chen Ai(College of Forestry and Horticulture, Xinjiang Agricultural University, Urumqi, 830052) |
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| Keywords: | Taraxacum kok-saghyz ISSR Single factor experiment Orthogonal experiment |
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