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山羊CPT1A基因的克隆表达及肌内脂肪含量的相关性分析
引用本文:梁计峻,林亚秋,俞雨阳,王永,朱江江.山羊CPT1A基因的克隆表达及肌内脂肪含量的相关性分析[J].华北农学报,2019,34(5).
作者姓名:梁计峻  林亚秋  俞雨阳  王永  朱江江
作者单位:西南民族大学 生命科学与技术学院,四川 成都,610041;西南民族大学 生命科学与技术学院,四川 成都 610041;青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省重点实验室,四川 成都 610041;青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省重点实验室,四川 成都 610041;青藏高原动物遗传资源保护与利用教育部重点实验室,四川 成都 610041
基金项目:国家自然科学基金;国家自然科学基金;国家重点研发计划;四川省科技支撑计划;西南民族大学研究生创新型科研项目
摘    要:旨在获得山羊肉毒碱棕榈酰基转移酶Ⅰ肝脏亚型CPT1A(Carnitine palmitoyltransferase 1A,CPT1A)基因序列,分析其生物学特征,阐明其组织及细胞分化时序表达规律,同时揭示CPT1A基因在背最长肌、股二头肌、臂三头肌中与肌内脂肪含量(IMF)的关系。选取7只1周岁健康简州大耳羊为试验动物,屠宰后迅速采集心、肝、脾、肺、肾、背最长肌、股二头肌、臂三头肌、皮下脂肪和腹间脂肪组织样品,利用TRIzol法提取总RNA。采用RT-PCR法克隆山羊CPT1A基因,进行生物信息学分析。利用实时荧光定量PCR技术检测CPT1A基因在不同组织中的表达水平以及CPT1A在山羊前体脂肪细胞分化过程中的时序表达。使用皮尔逊相关系数进行CPT1A基因表达量与IMF含量相关性分析。通过克隆得到CPT1A基因序列(MH345735)为2 380 bp,包含CDS全长2 319 bp,5′UTR 38 bp和3′UTR 23 bp,编码773个氨基酸。组织表达结果显示,CPT1A在简州大耳羊肝脏和肾脏中的表达水平极显著高于其他组织(P0.01)。细胞时序表达定量结果显示,CPT1A在诱导分化0~5 d逐渐升高,在第5天表达量最高(P0.01),5~9 d逐渐下降。CPTA基因表达量与IMF含量相关性分析结果显示,CPT1A基因表达量与各肌肉组织肌内脂肪含量均显著正相关。结果表明,CPT1A可能在肌内脂肪沉积过程中具有重要调控作用,为进一步研究CPT1A调控山羊脂质代谢的机理研究提供参考。

关 键 词:山羊  CPT1A基因  克隆  组织表达  肌内脂肪
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