| 猪繁殖与呼吸综合征病毒NJ-a株ORF6基因的表达及特异性抗体的制备 |
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| 引用本文： | 郑其升,杨瑞锋,毕志香,李鹏,于春梅,曹瑞兵,陈溥言.猪繁殖与呼吸综合征病毒NJ-a株ORF6基因的表达及特异性抗体的制备[J].南京农业大学学报,2008,31(2):154-158. |
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| 作者姓名： | 郑其升 杨瑞锋 毕志香 李鹏 于春梅 曹瑞兵 陈溥言 |
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| 作者单位： | 1. 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏,南京,210095
2. 山东省畜牧兽医职业技术学院,山东,潍坊,262101 |
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| 摘 要： | 根据GenBank公布的猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)VR2332 株的核酸序列设计并合成1对特异性引物,用RT-PCR方法扩增PRRSV NJ-a株ORF6基因,将其连接入pMD18-T载体,经测序后克隆入原核表达载体pET-32a( )上,构建原核表达载体pET-ORF6.阳性质粒转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),经异醛-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,PRRSV ORF6基因获得表达.以纯化的重组蛋白为抗原免疫家兔3次,获得抗PRRSV NJ-a株M蛋白的特异抗体.经Western-blotting证明,该多克隆抗体既能与原核表达的重组M蛋白发生反应,又能与PRRSV发生特异性反应;间接免疫荧光结果表明,获得的多克隆抗体与表达PRRSV M蛋白的293T细胞及感染PRRSV的Marc-145细胞发生反应.兔抗PRRSV NJ-a株M蛋白特异性抗体的获得,为进一步研究PRRSV M蛋白的表达和功能奠定了基础.
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| 关 键 词： | 猪繁殖与呼吸综合征病毒NJ-a株 ORF6基因 原核表达 抗体制备 |
| 文章编号： | 1000-2030(2008)02-0154-05 |
| 修稿时间： | 2006年12月28 |
Expression for the ORF6 gene of PRRSV NJ-a strain in Escherichia coli and its preparation of the specific polyclonal antiserum |
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| ZHENG Qi-sheng,YANG Rui-feng,BI Zhi-xiang,LI Peng,YU Chun-mei,CAO Rui-bing,CHEN Pu-yan.Expression for the ORF6 gene of PRRSV NJ-a strain in Escherichia coli and its preparation of the specific polyclonal antiserum[J].Journal of Nanjing Agricultural University,2008,31(2):154-158. |
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| Authors: | ZHENG Qi-sheng YANG Rui-feng BI Zhi-xiang LI Peng YU Chun-mei CAO Rui-bing CHEN Pu-yan |
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