斜带石斑鱼PKR基因的克隆表达及亚细胞定位分析 |
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引用本文: | 高品,魏京广,许濛,陈秀丽,秦启伟,周永灿.斜带石斑鱼PKR基因的克隆表达及亚细胞定位分析[J].热带生物学报,2016(3):285-289. |
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作者姓名: | 高品 魏京广 许濛 陈秀丽 秦启伟 周永灿 |
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作者单位: | 1. 海南大学海洋学院/海南省热带水生生物技术重点实验室,海口,570228;2. 中国科学院南海海洋研究所/中国科学院热带海洋生物资源与生态重点实验室,广州510301;中国科学院南海海洋研究所/广东省应用海洋生物学重点实验室,广州510301 |
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基金项目: | 国家科技计划项目973计划(2012CB114402),国家科技计划项目863计划(2012AA092201),国家科技支撑计划星火计划项目(2013GA780001),国家自然科学基金(31260644;31202022),国家海洋公益性项目(201205025),高等学校博士学科点基金(20124601110006),广东省科技计划项目(2014B030301064) |
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摘 要: | 根据实验室前期获得的斜带石斑鱼PKR基因的全长c DNA,对其原核表达、组织分布及亚细胞定位进行了研究分析。结果表明,斜带石斑鱼PKR基因c DNA全长为2 151 bp,其中ORF区为1 863 bp,编码621个氨基酸,表达蛋白的分子质量大小为70 157.15 Da,PI为5.72。通过NCBI网站上BLAST软件比对发现,斜带石斑鱼PKR与其他物种的PKR高度同源。通过构建原核表达载体PKR-p ET-32a,获得了斜带石斑鱼PKR的融合蛋白,经纯化后制备了斜带石斑鱼PKR鼠抗血清。利用荧光定量PCR对斜带石斑鱼PKR基因组织分布研究表明,该基因在所有检测组织中均有表达,其中肠的表达量最高,头肾次之。以荧光显微镜对其亚细胞定位进行了分析,该基因为全细胞分布,但主要分布于细胞质中。
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关 键 词: | 斜带石斑鱼 克隆表达 亚细胞定位 PKR基因 |
Molecular Cloning,Expression and Subcellular Localization of PKR from Epinephelus coioides |
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Abstract: | |
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Keywords: | Epinephelus coioides molecular cloning subcellular localization PKR |
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